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血液 3-羟-3- 甲戊二酰辅酶A （HMG-COA ）还原酶光谱法定量检测试剂盒 产品说明书（中文版） 主要用途 血液 3-羟-3- 甲戊二酰辅酶 A （HMG-COA ）还原酶光谱法定量检测试剂是一种旨在运用 3-羟-3- 甲戊二酰辅酶 A 作为底物，在还原酶的催化下，还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH ）氧化后吸 光峰值的降低，即采用光谱法来测定血液样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家 精心研制、成功实验证明的。其适用于各种动物或人体血液样品（血清、血浆、红细胞等）或纯化酶样品 3-羟-3- 甲戊二酰辅酶 A （HMG-COA ）还原酶的活性检测，以及抑制剂筛选。产品严格无菌，即到即用， 操作简捷，性能稳定。 技术背景 甲戊二羟酸通路（mevalonate pathway ），又称为3-羟-3- 甲戊二酰辅酶A （HMG-COA ）还原酶通路或甲戊二 羟酸依赖性通路，是所有高等真核生物和许多细菌具有的重要的细胞代谢通路，用于体内产生二甲基丙烯 焦磷酸（dimethylallyl pyrophosphate ；DMAPP ）和异戊二烯焦磷酸（isopentenyl pyrophosphate ；IPP ）作为 生物大分子合成的基础，包括蛋白质异戊二烯化、细胞膜维护、激素合成、蛋白固着、蛋白糖化等。3-羟 -3- 甲戊二酰辅酶A还原酶（3-hydroxy-3-methyl-glutaryl-CoA reductase ；HMGR ；EC1.1.1.34 ）是控制甲戊二 羟酸通路的关键的酶，调节胆固醇和类异戊二烯脂分子的产生。HMG-COA还原酶位于内质网膜上，含有8 个跨膜结构域，其中活性结构域在细胞浆里。HMG-COA还原酶是许多降脂药物的靶标，包括lovastatin （Mevacor ）、 atorvastatin （Lipitor ）、pravastatin （Pravachol ）和simvastatin （Zocor ）。在HMG-COA还原 酶的催化下，将4个电子的3-羟-3- 甲戊二酰辅酶A （HMG-COA ）还原为甲戊二羟酸（mevalonate ），同时产 生还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（reduced nicotinamide adenine dinucleotide phosphate ；NADPH ）被氧 化为氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（oxidized nicotinamide adenine dinucleotide phosphate ；NADP ），其 氧化后的吸光峰值变化（340nm 波长），来定量分析3-羟-3- 甲戊二酰辅酶A （HMG-COA ）还原酶的活性。 3-羟-3- 甲戊二酰辅酶A （HMG-COA ）还原酶反应系统为： 产品内容 缓冲液（Reagent A ） 毫升 反应液（Reagent B ） 微升 底物液（Reagent C ） 微升 阴性液（Reagent D ） 微升 产品说明书 1 份 保存方式 1 保存缓冲液（Reagent A ）、反应液（Reagent B ）和底物液（Reagent C ）在 －20℃冰箱里；其余的保存在4℃冰箱里；反应液（Reagent B ）和底物液（Reagent C ） 避免光照；有效保证6月 用户自备 抗凝管：用于血液样品采集的容器 1.5毫升离心管：用于样品操作和保存的容器 （微型）台式离心机：用于样品制备 比色皿或酶标板：用于光谱分析的容器 分光光度仪或酶标仪：用于光谱分析 实验步骤 一、 样品准备 选择一：血浆样品 1． 准备好抗凝管 2． 抽取1毫升血液，置于抗凝管里 3． 放进4℃微型台式离心机离心15分钟，速度