刘露琳2007300118青蛙与泥鳅的组织比较研究-深圳大学生物科学.PDF

动物生物学创新实验论文 青蛙与泥鳅的组织比较研究 刘露琳 组员：骆新娇 黄惠珠 （生命科学学院 生物科学 07 级 2007300118） 指导老师：李荔 应明 摘要： [目的]研究并比较水陆两生的无尾两栖类和水生的鱼类的组织学特征。[方法] 该研 究以青蛙和泥鳅为实验材料,对两者的表皮、肌肉、消化道等形态结构进行了研究，并将进 行了比较。实验采用常规石蜡切片法，对青蛙和泥鳅的各组织器官作了的解剖学观察与组织 学研究.。[结果]结果表明, 两栖类与鱼类的皮肤、肝脏、肠等组织在结构和功能上都存在 着相同点与不同点。在皮肤和肌肉上，两种动物都存在进化适应上的差异。对于消化系统， 鱼类和两栖类的消化系统都是正处于分化与末分化之间的类型,是较原始的类型。这些不同 都是鱼类向两栖类进化的象征，这次研究有助于今后对鱼类和两栖类的组织的进一步认识和 更好地揭示动物的进化过程。 关键词：青蛙;泥鳅;组织特征;组织比较 前言：有关无尾两栖类（蛙）皮肤、肌肉、消化道等组织和鱼类（泥鳅）皮肤、 消化系统等组织的研究国内外已有许多学者早有进行研究，但是并没相关两者的 各组织进行比较的研究。本实验通过比较研究发现两栖类与鱼类的组织的相同点 与不同点，有助于对鱼类和两栖类各组织的认识和更好地揭示动物的进化过程与 演变的过程。本研究旨在丰富两栖动物与鱼类的组织结构及机能的基础资料，为 显微水平研究进化问题提供更多依据，同时初步探讨动物在水生到水陆两生的过 程中组织的进化特点。 1 材料方法 1.1 材料 1.1.1 动物： 青蛙;泥鳅 1.1.2 动物来源： 实验动物是由指导老师统一购买后，经过一段时间培养后开始实验的。 1.2 方法 1.2.1 取材 泥鳅去其头部，从腹部纵向剪开，取其内部组织器官。利用双毁髓方法使青 蛙致死，剪开其头部，进行各组织分离，取其内脏组织器官，及时将所需组织放 入到固定液中。应尽可能采取新鲜的材料，尤其是动物取材时，应在杀死动物后 立刻进行，否则组织发生死后变化（时间稍久便发生组织自溶现象），使制片达 不到预期效果。 1.2.2 固定 某些材料在固定数小时后，仍需进一步修切，即用锋利的剃刀或刀片将不需 要的部分切除。将材料修切整齐后，再继续固定。时间 2-24 小时，若气温 4℃ 固定时间大于12小时，气温20-25℃固定2-6小时。 1.2.3 浸洗 固定后的材料，75%酒精浸洗，目的在于洗去固定液。先用少量洗 2 次后， 再浸洗2 次每次30分钟。 1.2.4 脱水和透明 采用逐渐提高酒精浓度，在 85%乙醇中浸泡 30 分钟，再到 95%乙醇中浸泡 30 分钟后，接着在无水乙醇中浸泡 30 后又在新的无水乙醇中浸泡 30 分钟，再 在二甲苯与乙醇以 1：1 混容的溶液中浸泡 30 分钟。最后到纯二甲苯中浸泡 20 分钟后又重新在新的纯二甲苯中浸泡 20 分钟。减少材料中水分的含量并脱去酒 精，这样可避免组织过度的收缩。 1.2.5 浸蜡（透蜡） 最后一次二甲苯透明后组织块切勿取出，在抽出上层二甲苯后，组织块不露 出液面为准，再加入等量石蜡。在 50%的石蜡二甲苯液中浸蜡 30min。这后在烘 箱中加热 100%石蜡，在半熔化状态下分别三次浸蜡各 1h（共 3h）。注意加盖防 止污染。 1.2.6 包埋 将熔化了的石蜡倒入纸盒内少许。然后用加温的镊子将材料从杯蜡中取出， 迅速放入纸盒内的蜡中，加蜡淹没组织。 1.2.7 切片 等蜡凝固后修蜡，徕卡切片机中切片(RM2126)。在切片之前需将蜡块切小， 切至材料四周剩留一小部分石蜡。切修时注意，蜡块四边和要切的那一面要切平， 特别是被切的上下两边要切平