组织学绪论introductionofhistology-西北师范大学.pptVIP

组织学绪论西北师范大学生命科学学院 研究内容 组织学（histology） 研究机体微细结构及其相关功能的科学 研究水平：组织、细胞、亚细胞和分子 比较组织学(compare histology) 研究不同动物微细结构及其相关功能的科学 用硝酸银将神经细胞染为黑色(镀银染色法) 用醛复红将弹性纤维和肥大细胞的分泌颗粒染为紫色 活体染色，即将无毒或毒性小的染料经静脉注入后，再取材制成切片观察。如注入的台盼蓝(trypan blue)可被肝、脾等器官内的巨噬细胞吞噬 。 在组织化学术,常使用荧光染料染色或作为标记物,用荧光显微镜观察 透射电镜术：组织块(lmm3)用戊二醛与饿酸两次固定，脱水后树脂包埋，用超薄切片机切片，再经醋酸铀和拧橡酸铅染色。电子束射落到切片时，随细胞构成成分的密度以及吸附重金属铀、铅、饿的程度不同，而发生相应的电子散射。当电子束技射到密度大、吸附重金属多的结构(如溶酶体)时，电子被散射得多，因此，射落到荧光屏上的电子少而呈暗像，电镜照片上呈黑或深灰色，习惯称该结构为高电子密度( electrondensity)；反之呈浅灰色，称低电子密度 扫描电镜术：不需要制备切片，组织块(约0.3cm大小)用戊二醛和饿酸固定后，经脱水、干燥，再于其表面喷镀薄层碳与金属膜。 核酸：福尔根反应显示DNA，甲基绿－派若宁反应同时显示DNA与RNA[切片先经稀盐酸处理，使DNA水解；再用希夫试剂处理，形成紫红色反应产物。如要同时显示DNA和RNA，则用甲基绿-派若宁反应。甲基绿与细胞核DNA结合呈蓝绿色，派若宁与核仁及胞质内的RNA结合呈红色] 酶类：酶与特异性底物的反应产物、再与捕捉剂反应，形成有色的沉淀物 [将切片置于含特异性底物的溶液中孵育，底物经酶的作用形成初级反应产物，它再和某种捕捉剂结合，形成显微镜下可见的沉淀物，即最终反应物。例如显示酸性磷酸酶，先将切片放入含有酶底物(常用β一甘油磷酸纳)的溶液(pH5.0)中孵育，底物经酶水解，释放磷酸；用捕捉剂硝酸铅与磷酸反应，形成微细的磷酸铅，沉淀于酶存在的部位，此时可在电镜下观察(经超薄切片技术加工后)；如再用硫化铵处理，磷酸铅被置换形成粗颗粒状的黑色硫化铅沉淀物，便可用光镜看到(图11-5 )。由于酶都是蛋白质,故近年更多采用免疫组织化学术显示 ] 本章重点 组织学、组织、嗜酸性、嗜碱性的概念 组织学学习方法要点 石蜡切片术和超薄切片术的基本原理 HE染色法 * * 肌动蛋白 肌球蛋白 肌钙蛋白 细肌丝 粗肌丝 肌球蛋白杆 肌球蛋白头 组织（tissue） 构成：细胞群和细胞外基质 细胞：机体结构和功能的基本单位，成人约有1015 个、200 余种 细胞外基质：由细胞分泌形成 类型：上皮组织、结缔组织、肌组织和神经组织；组织以不同的种类、数量和方式组合形成器官；若干功能相关的器官构成系统 意义 促进了生理学的进步 是病理学的基础 促进人类对自身的深入了解 发展简史 光学显微镜简称光镜（light microscope，LM） 16 世纪末荷兰人发明光镜 1665 年英国人胡克命名“细胞” 意大利人马尔比基观察了脾、肺、肾、表皮 荷兰人列文虎克发现红细胞、精子、肌纤维；格拉夫发现卵泡 1801 年法国人比沙提出“组织”概念 细胞学说 德国人施万、施莱登（1838、1839）提出了细胞学说. 内容：细胞是一切动、植物体的基本结构和功能单位；细胞内进行着复杂的化学反应；新细胞由原有细胞产生 由于显微技术的提高、组织切片机的发明、生物标本的固定和染色方法的出现，19世纪下半叶成为组织学和细胞学发展的黄金时代。到19世纪末人们已能较正确地描述细胞结构。 电子显微镜简称电镜（electron microscope, EM） 1932 年 德国人卢斯卡和科诺尔发明电镜，使分辨率从0.2μm提高到 0.2nm 约二十年后出现超薄切片术（50~80nm）同时，以观察物体表面结构的扫描电镜问世组织学进入第二个黄金时代。 可观察超微结构（ultrastructure）：即细胞膜、细胞器、染色体等亚细胞结构，组织学从细胞水平飞跃到了亚细胞水平。 当代组织学 新仪器、新技术的发明和应用，如图像分析仪、共焦激光扫描显微镜、流式细胞仪等。 免疫组织化学技术能显示细胞和组织中的蛋白质，提供其定位、定性和定量的信息，可获知亚细胞结构的蛋白组成、空间分布关系及在细胞不同时期的变化。 原位杂交技术能在切片上特异性地显示器DNA与mRNA片断，提供细胞所含基因及其表达的信息。 免疫组织化学技术和原位杂交技术将组织学引入分子水平。 组织工程学技术拓展了组织学的临床应用前景，在体外模拟培养皮肤、软骨、骨等器官和组织。 学习方法 审视角度 组织水平：层次顺序、特征性结构和