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样品要求上传日期:201120
送样要求
动植物基因组从头测序三、送样要求
1、DNA样品:基于Illumina平台,PE文库DNA浓度≥20 ng/μl,总量≥6μg(荧光定量),MP文库DNA浓度≥40ng/μl,总量≥12μg(荧光定量);基于Roche 454 FLX+ 平台,DNA浓度≥20ng/μl,总量≥3μg(荧光定量),电泳检测无明显RNA条带,基因组条带清晰、完整,主带应在100 kb以上。若样品中有多糖、糖蛋白的残留, 对打断DNA样品带来非常大的困难,且很难去除,因此特别要求所提供的样品不要有多糖或糖蛋白污染。
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2、动物样品:样品最好来自纯系,对于一般物种应挑选肝脏、肾脏、血液等组织取样,对于珍贵物种请提供耳样、毛发(带毛根)等脂肪含量较少的组织进行取样。为了减少个体差异对后续拼接产生的影响,尽量从同一个个体中取样。若物种体积较小,从一个个体中提取的DNA量不能满足测序实验所需,在保证量的前提下,应尽量减少采样个体的数量。提供组织样品应500mg,尽量提供较多量,不用的物种DNA提取产物有差异。
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3、植物样品:样品最好来自纯合体或单倍体。需为黑暗无菌条件下培养的黄化苗或组织样品。提供组织样品应500mg,尽量提供较多量,不同的物种DNA提取产量有差异
动植物基因组重测序三、送样要求
1、DNA样品:Miseq DNA PE 文库浓度≥20 ng/μl,总量≥6μg(荧光定量);Miseq DNA?MP文库浓度≥40ng/μl,总量≥12μg(荧光定量);454 DNA库浓度≥20ng/μl,总量≥3μg(荧光定量),电泳检测无明显RNA条带,基因组条带清晰、完整,主带应在100 kb以上。若样品中有多糖、糖蛋白的残留, 对打断DNA样品带来非常大的困难,且很难去除,因此特别要求所提供的样品不要有多糖或糖蛋白污染。??
2、动物样品:对于一般物种应挑选肝脏、肾脏、血液等组织取样,对于珍贵物种请提供耳样、毛发(带毛根)等脂肪含量较少的组织进行取样。为了减少个体差异对后续拼接产生的影响,尽量从同一个个体中取样。若物种体积较小,从一个个体中提取的DNA量不能满足测序实验所需,在保证量的前提下,应尽量减少采样个体的数量。??提供组织样品应500mg,尽量提供较多量,不用的物种DNA提取产物有差异。
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3、植物样品:? 植物材料应尽量选取植物组织幼嫩部位。提供组织样品应500mg,尽量提供较多量,不用的物种DNA提取产物有差异。
微生物基因组从头测序三、送样要求
1、细菌:浓度≥200 ng/μl,总量≥50 μg;OD260/280值介于1.8-2.0之间的细菌基因组DNA,并确保电泳检测无明显RNA条带,基因组条带清晰、完整,主带应在100 kb以上,DNA无降解,无污染。???
2、真菌:样品浓度≥200 ng/μl,总量≥50 μg,OD值介于1.8-2.0之间的DNA,样品浓度越高越好。真菌的De novo 测序获得精细图,若基因组大小介于10~45Mb之间,需提供至少100μg的DNA,若基因组大小大于45Mb,则需200 μg的DNA。??
3、样品保存期间切忌反复冻融。?
4、送样管务必标清样品编号,管口使用Parafilm 膜密封。?
5、提供DNA电泳检测照片,用自封袋密封后随样品一起送样。
微生物基因组重测序1、 细菌:浓度≥200 ng/μl,总量≥50 μg ,OD260/280值介于1.8-2.0之间的细菌基因组DNA,并确保DNA无降解,无污染。2、 真菌:样品浓度≥200 ng/μl,总量≥50 μg ,OD260/280值介于1.8-2.0之间的DNA,样品浓度越高越好。?
3、 样品保存期间切忌反复冻融。?
4、 送样管务必标清样品编号,管口使用Parafilm 膜密封。?
5、 提供DNA电泳检测照片,用自封袋密封后随样品一起送样。
有参考基因组的转录组测序?
1. 总RNA:针对Ion proton测序平台,浓度≥100 ng/ul,要求总量≥1 μg;针对Illumina测序平台,浓度≥80 ng/ul,总量≥12 μg;OD260/280介于1.8-2.2之间,OD260/230值应≥2.0。电泳检测28S:18S至少大于1.5;并确保RNA无降解,无污染;或提供浓度≥50 ng/μl,总量≥500 ng的mRNA,同时,提供质量检测相关数据和图片,包括分光光度计、电泳胶图或Nanodrop仪器检测数据,不建议提供mRNA,较难定量。
2. 组织样品:动物、植物、微生物总量大于500 mg的新鲜样品(植物材料应尽量选取幼嫩部位)。采样后将样品立即用RNAlater和液氮速冻,保存于-80℃(保存期不超过一个月),送样时使用干冰运输(不超过72 h);提取RNA后经变性电泳,保证各RNA条带清晰
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