棘腹蛙生长激素／类胰岛素样生长因子轴关键基因的-动物营养学报.PDFVIP

动物营养学报２０１７，２９（７）：２４９２⁃２５０１ ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌ ｏｆ ＡｎｉｍａｌＮｕｔｒｉｔｉｏｎ 　 ｄｏｉ：１０．３９６９／ ｊ．ｉｓｓｎ．１００６⁃２６７ｘ．２０１７．０７．０３４ 棘腹蛙生长激素／ 类胰岛素样生长因子 轴关键基因的克隆与序列特征分析 ∗ 罗　 洁　 姜玉松　 杨　 帆　 樊汶樵 　 李晓英 （重庆文理学院林学与生命科学学院，重庆珍稀濒危水产资源保护与开发研究中心，重庆 ４０２１６８） 摘　 要： 机体的生长激素（ＧＨ）／ 类胰岛素样生长因子（ＩＧＦｓ）轴由ＧＨ 系统和 ＩＧＦｓ 系统构成， 可促进细胞增殖、调节生长发育、调控生理代谢，在机体生长发育调控方面有着重要作用。 为明 确棘腹蛙ＧＨ／ ＩＧＦｓ轴的功能结构和进化特征，为棘腹蛙生长发育调控方面的研究提供理论依 － － 据，本试验对棘腹蛙ＧＨ、类胰岛素生长因子 Ⅰ（ＩＧＦ⁃Ⅰ）和类胰岛素生长因子 Ⅱ（ＩＧＦ⁃Ⅱ）进 行克隆并对其序列特征进行分析。 结果显示：１）与两栖类模式动物的多重序列比对发现，棘腹 蛙ＧＨ、ＩＧＦ⁃Ⅰ和ＩＧＦ⁃Ⅱ的功能结构域严格保守，具有一定的遗传多态性；ＩＧＦ⁃Ⅱ的Ｎ 端呈简缩 进化趋势。 ２）遗传进化聚类分析发现，棘腹蛙ＩＧＦｓ 与两栖动物聚为一支，并与硬骨鱼相对近 缘，说明ＩＧＦ⁃Ⅰ和ＩＧＦ⁃Ⅱ进化地位相对原始；棘腹蛙 ＧＨ 则与蛙类、鱼类等水生动物相对近缘， 暗示该基因具有趋同进化趋势。 ３）为进一步明确上述基因的特异性功能位点，利用Ｓｗｉｓｓ⁃ｍｏｄｅｌ ｓｅｒｖｅｒ软件解析其蛋白质结构，最终确定ＩＧＦ⁃Ⅰ的ＴＨＲ５２、ＬＥＵ５３、ＰＨＥ７２、ＰＨＥ７３、ＳＥＲ７４ 为潜 在的功能分化位点，ＩＧＦ⁃Ⅱ的ＴＹＲ８１、ＬＹＳ８２、ＬＹＳ８３ 为潜在的功能分化位点，ＧＨ 的ＰＨＥ２０８ 为 潜在的功能分化位点。 由此可知，棘腹蛙ＧＨ／ ＩＧＦｓ轴的主要基因相对保守，但与已知模式物种 相比，存在潜在的功能分化位点，可作为后期棘腹蛙 ＧＨ／ ＩＧＦ 轴功能研究和遗传进化特征分析 的分子靶标。 关键词： 棘腹蛙；类胰岛素生长因子；生长激素；序列分析；结构特征 中图分类号：Ｓ９１７．４　 　 　 　 文献标识码：Ａ　 　 　 　 文章编号：１００６⁃２６７Ｘ（２０１７）０７⁃２４９２⁃１０ 　 　 生长激素（ＧＨ）是腺垂体细胞分泌的肽类激 属于无尾目，蛙科，棘蛙属，是我国西部中高海拔 － ［２ ３］ 素，是影响动物生长和发育的主要内源因素。 类 区域特有的珍稀两栖动物 。 由于环境污染、生 胰岛素生长因子（ＩＧＦｓ）分为类胰岛素生长因 态破坏等原因，野生棘腹蛙的规模日趋萎缩，现已 ［４］ － － 被《中国濒危物种红皮书》 、《中国物种红色目 子 Ⅰ（ＩＧＦ⁃Ⅰ） 和 类 胰 岛 素 生 长 因子 Ⅱ ［５］ （ＩＧＦ⁃Ⅱ）２种类型，是存在于血浆内的一类既有促 录》 等收录。 棘腹蛙目前市场需求旺盛，人工饲 生长作用又有胰岛素样作用的多肽。 目前已阐明 养的子二代出栏价达到４５～７０元／ ｋｇ，其人工养殖 机体的生长是由ＧＨ／ ＩＧＦｓ轴所控制，ＧＨ 从垂体