甘草酸单铵盐原料药主成分异构体及其与有关物质同时分离-药学学报.PDFVIP

1286 药学学报 Acta Pharmaceutica Sinica 20 13, 48 (8): 1286 1291 草酸单铵盐原料药主成分异构体及其与有关物质 同时分离检测和结构确证 1, 2* 1 1 1 2 2 赵燕燕 , 刘丽艳 , 韩媛媛 , 李月秋 , 王 艳 , 石敏健 (1. 河北大学医学实验中心, 河北 保定 071000; 2. 河北大学化学与环境科学学院, 河北省分析科学技术重点实验室, 河北省化学生物学重点实验室, 河北 保定 071002) 摘要: 建立简单、灵敏、快速的高效液相色谱法, 对甘草酸单铵盐原料药中主成分异构体进行分离以及同时 与有关物质的分离检测, 并对各待测物结构进行鉴定。参考欧洲药典7.0 版 (EP7.0) 、英国药典20 12 版 (BP20 12) 、 中国国家药品标准 (WS -XG-2002) 及国内外相关文献, 对流动相的 成进行选择, 通过优化流动相中盐的浓 1 度、水系溶液的pH 值、有机相的加入比例、柱温及流速等参数, 确定了最佳的色谱条件: 采用Durashell C 18 色 谱柱 (250 mm ×4.6 mm, 5 μm), 以0.01 mol ·mL 1 高氯酸铵 (氨水调至pH 8.2) 甲醇 (48 ∶52) 为流动相, 流速 0.8 mL ·min 1, 检测波长254 nm, 柱温50 ℃, 进样量 10 μL 。利用质谱、核磁共振谱、紫外光谱和液相色谱等实 验技术对获得的 18 -甘草酸、18β-甘草酸、有关物质 A 、有关物质 B 对照品结构进行确证, 以保证其结构的准确 无误; 采用高效液相色谱法对法定机构提供的甘草酸单铵盐对照品进行定位, 并采用二级管阵列检测器分析测 定各待测物色谱峰的纯度。在优化的色谱条件下, 18 -甘草酸、18β-甘草酸、有关物质A 和B 在0.50～100 μg ·mL 1 内线性关系良好 (r = 0.999 9), 检出限分别为0.15、0.10、0.10 和0.15 μg·mL 1 。本方法检测灵敏、重现性好、结 果准确可靠, 可用于甘草酸单铵盐原料药主成分异构体及其与有关物质的同时分离检测。在 EP7.0、BP2012 收 载的甘草酸单铵盐质量标准中, 对主成分异构体的分离以及对色谱图中相对保留时间约为 1.2 的物质的结构归 属有待商榷。本方法能 为甘草酸原料药、制剂以及中药材的质量标准的制定、质量控制及结构鉴定提供依据。 关键词: 甘草酸单铵盐; 18 -甘草酸; 18β-甘草酸; 有关物质 中图分类号: R9 17 文献标识码: A 文章编号: 0513-4870 (20 13) 08- 1286-06 Simultaneous separation and detection of principal component isomer and related substances of raw material drug of ammonium glycyrrhizinate by RP-HPLC and s