研磨仪的应用条件探索 一、处理材料：葡萄幼叶 1 用直径6~8mm打孔器.DOCVIP

研磨仪的应用条件探索 一、处理材料：葡萄幼叶 1 用直径6~8mm打孔器在叶片合适的部位打孔，获取研磨材料叶圆片。 2 将5~6颗直径为3mm研磨珠和若干（8片）叶圆片放置于2ml离心管（EP管）中。 3 将加完叶圆片和研磨珠的EP管，在适配器上摆好，开盖，加液氮冷冻；3~5分钟后，待叶圆片在冷冻的情况下脱去水分，及时将EP管的盖封闭上，继续在液氮中遇冷3分钟。 4 需素将适配器安置到研磨仪上。 5 1200rpm条件下，研磨3分钟，可得到细碎的叶片粉末，用于提核酸或蛋白。（研磨时间和转速还可以进一步优化） 研磨仪推广对象分析 同样的方法对冻存的葡萄叶片，研磨时加入1~2颗5mm的珠子，效果也非常好！因此，根据实验，我们可以在一下实验室推广研磨仪： 1 以木本植物（果树、林木等）为研究材料； 2 需要高通量提取核酸、蛋白或是糖类等物质来进行遗传或是生理生化分析研究的实验室或项目（如：各种果树的分子标记研究项目）。 二、处理材料：白菜叶片 （冰箱冻存） 1 分装珠子并标号：内侧两排装1颗5mm珠子和5颗3mm珠子；外侧两排6~7颗3mm珠子。在2ml离心管的侧壁和盖上分别编号，使其与样品对应好。 2 冻存样品白菜叶片分装：按照对应关系，将冻存样品迅速装入离心管内，并盖上盖子，以防止吸潮。为了使提取物浓度一致，尽量在分装时保证每管内的样品量均一。注意样品不得超过总体积的三分之一，样品尽量保持松弛状态，不能压在一起，以免冻成一坨。 3 冷冻：将摆好的夹具（确定好内外行），放到泡沫箱中，加液氮冷冻，3-5分钟，充分冷冻夹具及管内样品。 4 转速与时间设定：1500转 2min 5 研磨：在上夹具时，要注意一是要带上厚一点的手套，防止被液氮冻伤；一是要迅速，且要保证螺栓拧紧，卡上保险扣。然后，启动研磨。 6 取下夹具，使整体离心管盖子向上，在桌面上拍一拍，使样品粉末沉落管底，进行下一步实验。 研磨仪推广对象分析 由对白菜叶片研磨的成功，我们可以直接向做蔬菜和花卉的实验室来推广研磨仪。 三、处理材料：水稻叶片 （冰箱冻存） 1 将离心管编号，对应编号将相应的水稻叶片截成1cm左右的小段，每个离心管中放3段，用镊子夹住中间位置，放入管底。 2 分装珠子：内侧两排装2颗5mm珠子和5颗3mm珠子；外侧两排装1颗5毫米珠子和6颗3mm珠子。 3 冷冻：将摆好的夹具（确定好内外行），放到泡沫箱中，加液氮冷冻，3-5分钟，充分冷冻夹具及管内样品。 4 转速与时间设定：1500转/分钟 3min 5 研磨：在上夹具时，要注意一是要带上厚一点的手套，防止被液氮冻伤；一是要迅速，且要保证螺栓拧紧，卡上保险扣。然后，启动研磨。 6 取下夹具，使整体离心管盖子向上，在桌面上拍一拍，使样品粉末沉落管底，进行下一步实验。 研磨仪推广对象分析 由对水稻叶片研磨的成功，我们可以直接向对作物（水稻、玉米、小麦等）研究的的实验室来推广研磨仪。 总结：研磨仪在农业系统中，推广的对象包括农业院校及农业科研单位中的：园艺学（果树、蔬菜、花卉、牧草等研究方向）、林学（林木遗传研究）、农学（作物遗传育种等研究方向）；种子和农产品质量管理部门、种子公司等。 在畜牧、食品和环境等其他专业方面应用，可能还要进一步发掘。