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贝克曼库尔特Ac*T diff 2分析仪 临床应用手册 目录 第一部分 Ac*T diff2血细胞分析仪工作原理简介 一、库尔特原理 二、库尔特专利技术 第二部分 血细胞直方图介绍 一、直方图的导出 二、白细胞直方图 三、红细胞直方图 四、血小板直方图 第三部分 检测参数介绍 一、白细胞系列参数 二、红细胞系列参数 三、血小板系列参数 第四部分 常见的旗标及其临床意义 一、旗标类型 二、常见旗标的临床意义 第一部分 Ac*T diff2血细胞分析仪工作原理简介 Ac*T diff2是贝克曼库尔特公司推出的最新款三分类血液分析仪，检测速度为60样本/小时，能报告18个临床参数及3个血细胞直方图。 该仪器的检测原理包括： 库尔特原理 — 用以检测细胞数量和体积，同时构筑细胞体积分布直方图； 单色光比色原理 — 用以检测血红蛋白。 Ac*T diff2血液分析仪吸入的样本将被分成两部分稀释，一部份送到红细胞计数池进行红细胞和血小板计数；另一部份在完成红细胞的溶解和血红蛋白的转化后在白细胞计数池进行白细胞计数和血红蛋白测定。红细胞、血小板和白细胞都是根据库尔特原理计数得来；血红蛋白是利用分光光度计比色得到；白细胞的三分类根据白细胞体积分布直方图得来。 一、库尔特原理 库尔特原理是利用电阻抗法测量细胞的数量和体积。其内容为：血细胞是电的不良导体，当一个细胞通过计数小孔时，会导致小孔两端电阻的瞬间变化，将其转化成脉冲，感应器通过检测脉冲的数量及大小，从而计算出通过小孔的细胞数量及体积。 如图1：细胞计数池中，小孔内外两个电极和稀释液构成一个电流回路，在负压的作用下，细胞依次通过小孔，电极能感应到一个瞬间的电阻变化，并将其转换成脉冲，脉冲的数量代表细胞的数量，脉冲的大小反映细胞的体积大小。 利用库尔特原理，能够对白细胞进行计数并根据体积分布进行三个亚群的分类；对红细胞和血小板根据体积进行区分并分别计数。 图1 库尔特原理示意图 二、库尔特专利技术 1．脉冲编辑 当细胞从小孔中央通过时，将得到一个规则的脉冲，反之将得到不规则的脉冲，不规则脉冲的机率可以根据细胞浓度和小孔的面积进行推算，在这种情况下仪器将删除不规则脉冲，并进行校正。 重叠校正 当两个或两个以上的细胞重叠在一起，同时通过计数孔时，将只有1个脉冲被检测到，这样会导致细胞数假性下降，体积数假性上升，这种重叠的机率可以根据细胞浓度、小孔的面积及流速进行推算，仪器本身能将这种重叠进行校正。 3．三次计数和延长计数： 在库尔特血液分析仪上，每一个样本都要进行三次计数，结果取三次计数的平均值。如果三次结果统一，结果将取平均值；如果有一次结果不好，结果将取另外两次计数的平均值并标以旗标；如果三次结果均不统一，仪器将不给出数值，结果以“------”代码替代。 在计数的同时，感应器将检测通过的细胞数量是否足够进行直方图分析，并将自动延长少于界定数量标本的计数时间，以保证达到一定的统计数量，减少统计学误差。 4．扫流技术 由于红细胞和血小板在同一个计数池，红细胞在经过小孔后，可能发生回流，触及小孔感应区，电极就会感应到一个微弱的脉冲，而将其计成血小板，导致血小板数量假性上升。为了防止这种干扰，库尔特运用扫流技术，在小孔后侧安装一个液流装置，及时将通过小孔的红细胞冲走，消除回流对血小板的干扰。 5．血小板拟合技术 血小板的体积范围在0fl～70fl，在实际计数中，为了排除2fl以下电子背景和杂质的干扰，以及20fl以上小红细胞和其他细胞的干扰，根据血小板的对数正态分布理论，在红细胞/血小板计数池中只计数2fl～20fl的血小板，用电子拟合曲线拟合出0fl～70fl范围的血小板数量。通过拟合可以有效排除干扰，使结果更准确。 第二部分 血细胞直方图介绍 一、直方图的导出 在细胞通过小孔计数时，感应器收集脉冲的大小及数量，转换为相应的细胞体积和数量，将体积为横坐标，以细胞的相对数量为纵坐标，就得到某一种细胞的体积分布直方图。血细胞直方图通常有三种：白细胞直方图、红细胞直方图和血小板直方图。 二、白细胞直方图 进入白细胞计数池的样本要经过溶血剂处理，这时红细胞快速溶解，白细胞失水皱缩，皱缩后的白细胞形成体积差异明显的三个亚群，在直方图上表现为三个峰区，根据直方图在不同体积段三个峰区的比例，决定白细胞三个亚群的百分比。图2为典型的白细胞直方图。 该直方图体积分布范围在30～450fL，大于35fL的颗粒被计数为白细胞，30～35fL用于观察异常细胞群和细胞碎片。从白细胞直方图上，可以明显地看到三个细胞分布区：最左边又高又陡的峰，跨度35～90fL，是淋巴细胞峰，以成熟淋巴细胞为主；最右边又低又宽的峰，跨度160～450fL，是粒细胞峰，以中性粒细胞为主；两峰之间的平台地带，从90～160