病原学监测.DOC

土源性线虫病监测一、监测对象 各监测点年龄在3周岁（含3周岁）以上的常住人口，外来人口居住满一年以上者。常住人口外出6个月以上者除外。 二、监测时间 三、检查方法 1 采用改良加藤厚涂片法（Kato-Katz法）进行病原学检查。 23～12周岁儿童加做透明胶纸肛拭法检测蛲虫卵。 （一）、改良加藤厚涂片法（Kato-Katz法）操作步骤 1材料的准备 1.1 塑料定量模板(统一供应)：规格为30mm×40mm×1mm的聚苯乙烯模板，中央孔为圆台形，其短径3mm，长径4mm，高1mm，容积为38.75mm3； 1.2 软性塑料刮片(统一供应)：两头刮片型； 1.3 尼龙绢片(统一供应):规格为80～100目裁剪成8cm×8cm大小； 1.4 透明液的配制：取100ml蒸馏水、100ml纯甘油、3%的孔雀绿（或亚甲蓝）1ml，按此比例混合均匀； 1.5 亲水性透明玻璃纸(统一供应)：规格为30mm×25mm、厚40μm，使用前需在透明液中浸泡24小时以上，使玻璃纸显示绿色 1.6 载玻片：规格为75mm×25.5mm，厚1.0mm～1.2mm； 1.7 其它：原始登记表、镊子、剪刀、记号笔、标本盒、吸水纸、光学显微镜和一次性手套等。 2 操作步骤 2.1 编号：每份粪样取1张载玻片进行编号（与待检粪样的编号相同）； 2.2 打开待检粪样的包装，将尼龙绢片置于待检粪样上，用塑料刮片轻压尼龙绢片并在其上轻刮，使细粪渣透过尼龙绢片的微孔滤出至绢片表面； 2.3 将定量板放在载玻片中部，然后用刮片将绢片表面的细粪渣填入定量板的中央孔内，使填满全孔并抹平； 2.4 小心移去定量板，使粪样留在载玻片上； 2.5 取一张浸泡好的亲水玻璃纸，抖掉多余的浸泡液，盖在粪样上，用橡皮塞或另一块较厚的载玻片覆于玻璃纸上垂直均匀用力压制，使粪便均匀地展开至玻璃纸边缘； 2.6 待粪便透明后及时镜检。 3 结果观察 3.1将透明后的加藤片置于光学显微镜的载物台上，在低倍（10×）镜下进行镜检。镜检时仔细检查每一视野，并特别注意受精蛔虫卵与未受精蛔虫卵的鉴别。 3.2虫卵计数方法 每张涂片发现的蛔虫卵、鞭虫卵、钩虫卵、其他吸虫卵都要计数。镜检所用显微镜统一目镜为10×的镜头。由于一些地区蛔虫感染度特别重，有时一张涂片虫卵数达数千甚至数万个，计数蛔虫卵比较费时，为此对蛔虫卵计数作以下规定：每张涂片首先随意粗查几个视野，若每个视野蛔虫卵数在10个以上，可以暂不计数蛔虫卵。先读完全片各视野的钩虫卵数和鞭虫卵数等，再用定视野抽查法推算全片蛔虫卵数。具体步骤是： 3.2.1按下图分布固定抽查10个视野，并算出抽查的10个视野蛔虫卵总数； 10个视野分布图 3.2.2计算出该涂片粪膜视野数，再推算出全片蛔虫卵数。 按一定的规律，如自左而右，自上而下，再自右而左，一行接一行，一个视野接一个视野地用推行器移动涂片，数出全片粪膜视野数，则： 全片粪膜蛔虫卵总数＝抽查的10个视野蛔虫卵数之和×全片粪膜视野数÷10 例：抽查的10个视野蛔虫卵数相加为366，全片粪膜视野数为78，则： 全片粪膜蛔虫卵总数＝366×78÷10＝2854.8≈2855 3.3 结果登记 观察的结果即时记录在原始登记表上，并及时转登附表1。 4 注意事项 4.1亲水性透明玻璃纸：使用前需全部浸入透明液中，浸泡24小时以上。 4.2把刮片上的细粪渣填入定量板时，必须填满中央孔全孔并抹平；压制涂片时尽量使粪便均匀展开至玻璃纸边缘，但应避免粪渣溢出。 4.3涂片放置时间长短是确保镜检质量的关键。一般室温25℃、75%湿度以下，涂片放置时间不宜超过2小时；若温度低，空气湿度大，涂片放置时间可适当延长。总之，涂片放置时间取决于粪样透明度，只要透明了，就应及时镜检，否则透明过渡，薄壳虫卵易变形看不清楚，会造成漏检或误判。 4.4 用椭圆孔塑料定量板，每孔所容粪便重量平均41.7mg，每片所得虫卵数乘以24，即得每克粪便的虫卵数。粪检时每片虫卵数不必乘24，填在附表1的数值为实际数的虫卵数（不乘24）。 4.5 粪样一送三检，三片全计数后取平均值。 （二）透明胶纸肛拭法操作步骤 1 材料 牛皮纸（或聚乙烯塑料薄膜）、市售透明粘性胶带纸（宽约2.6cm）、载玻片、小纸袋。 2 步骤 2.1将牛皮纸（或聚乙烯塑料薄膜）剪成长10cm、宽8cm，在中央剪一个直径2.4cm圆形孔。（略大于1元钱硬币）； 2.2用透明胶带纸补贴圆形孔； 2.3再把载玻片盖在胶带纸上（保护胶面），装入纸袋中，纸袋外面写上受检者姓名、年龄、性别和编号； 2.4检查时，取下载玻片，将有胶的一面在肛周粘压后，覆回载玻片装入纸袋，带回实验室镜检。 附：虫卵图（直接涂片中） （Kato-