病理技术在动物试验应用中的心得体会-中国试验动物学报.DOC

实验病理标本前期处理应注意的若干问题 李建瑛,刘江伟,许琴,张东辉,赵红艳,是文辉,李佳佳,董翔,马娜,许永华 兰州军区乌鲁木齐总医院动物实验科，乌鲁木齐，830000 [摘要] 实验病理技术中标本的取材、固定以及后续的制片染色，对病理诊断结果的可靠性、真实性有很大的影响，本文对动物实验病理制片关键步骤中易出现的问题及对策进行探讨。 [关键词] 实验病理；组织固定；切片制作；病理诊断 Several issues should be mentioned before pathological specimen processing LI Jian-ying, LIU Jiang-wei, XU Qin, ZHANG Dong-hui, ZHAO Hong-yan, SHI Wen-hui, LI Jia-jia, DONG Xiang, MA Na, XU Yong-hua Animal Experiment Department, Lanzhou Military District Urumqi General Hospital, Urumqi, 830000, China. [Abstract] Experimental pathology is an important part of life science research associated with animal experiment. Acquisition and fixation of optimum specimen and subsequent section of paraffin embedded tissue and dyeing are key factors playing important role in reliability, authenticity of pathological diagnosis. This paper summarizes the problems encountered in pathological section making of animal experiment and it correspond solutions. [Key words]? Experimental Pathology;?Tissue Fixation;?Section Making; Pathological Diagnosis 近几年随着病理技术大力发展，在医学领域成果倍出。笔者从事动物实验病理技术多年，发现部分科研人员对病理技术不了解，缺乏病理基础知识，甚至得出错误结论，造成人为的损失，其共性是轻视了病理组织标本的前期处理，这是一个在病理工作中十分关键的步骤，根据笔者多年工作经验对该问题谈谈体会。 1 取材前的准备工作 1.1 取材器械准备 准备一支HB铅笔，一套取材器械，包括：组织剪、无齿镊、刀柄及一次性手术刀片。标本取材的编号一定要用铅笔标注清晰。取材器械要锋利，尤其是手术刀片要定期更换。 1.2 固定液的选择 固定液需根据标本制作的需要而选择不能一概而论。常用固定液有以下几种：①甲醛：一般作为固定剂使用的10%甲醛是用水和40%甲醛（9：1）混合而成，实际上是4%的甲醛溶液[1]。②中性甲醛：是最常用的固定液之一，固定效果好，为免疫组织化学最常用的固定液，对组织穿透性好，组织收缩小。③多聚甲醛：该固定液适用于动物灌注固定取材，也可用于组织标本的较长时间保存，也可用于光镜及免疫组织化学实验。④戊二醛（C5H8O2）电镜固定液：戊二醛固定液的优点是对糖原，糖蛋白，微管内质网和细胞基质等有较好的固定作用。一般戊二醛的pH为4.0-5.0贮存时间过长时pH会下降，当pH降至3.5以下就不能使用，戊二醛原液应在冰箱保存[2]。 1.3 固定标本容器的选择要合适 有时标本瓶口过小，等到修材时，无法取出标本从而引起由于过度牵拉而导致组织形态结构的破坏；有时出现标本大小与固定液溶积比例不合适，固定液过少而造成组织渗透不全固定不完全[2,3]。 2 取材 2.1 阴性对照组标本的取材 动物实验中均有阴性对照组，在动物实验病理中一定要取3至5只，排除其个体差异。标本的取材一定要正规，不能随意对待标本。 2.2 组织标本的取材 主要取之于活组织检查标本、动物模型组织标本、解剖标本均为新鲜组织夹取标本用无齿镊，以免对组织造成人为损伤。如机体死亡2h以上的组织可能有不同程度的自溶，其抗原可能发生变性消失或严重弥漫现象，因此尽块固定处理以免影响免疫组织化学标记效果。防止人为因素的影响：切取组织时应用锋利的刀剪，刀刃宜薄、并足够长。一般标本切取的组织块厚约0.2-0.3cm，根据情况可略作调整，大小以1.5×1.5×0.2-0.3cm