一种简易的小牛血清制备方法.pdf

第19卷第4期 生 物 杂 志 Vol.19 No.4 2002年8月 Aug,2002 文章编号:1008一9632(2002)04一0039一02 一种简易的小牛血清制备方法 何莉芳，刘 静 (中南大学湘稚医学院生物学教研室，湖南长沙 410078) 摘要:小牛血清是细胞组织培养中常用的培养塞成份。介绍一种简易、快捷的小牛血清制备方法，经该方法制备的血清质量穗 定，其在实际应用中效果良好。 关键词:小牛血清;制备;细胞组织培养 小牛血清是组织细胞培养中最常用的天然培养基之 3.2 戴好手套，铺好孔巾，用巾钳固定。沿气管中线旁 一。血清中含有许多能维持细胞生长增殖不可缺少的成 开lcm切开皮肤，切口约5一7cm长，小心分离组织，游离 分，包括大分子的蛋白质、多肤、激素及各种氨基酸、葡萄 山颈动脉，用弯头止血钳将颈动脉挑起，迅速用一把止血 糖、酮酸等营养成分。实验证明血清对细胞附着和保护 有明显作用，且能中和有毒物质的毒性，使细胞不受伤 害。鉴于目前市售的小牛血清质量不一，本实验室多年 来一直自己制作小牛血清，形成了一种切实可行的、简易 的小牛血清制作方法。肉眼观察我们自制的血清，呈淡 黄色透明溶液，无溶血和沉淀物，符合小牛血清的质量标 准。我们自制的小牛血清已广泛应用于本校医学细胞生 物学课程中的人类外周血淋巴细胞培养实验、细胞原代 培养和传代培养实验、以及其他方面的组织细胞培养，使 采血瓶 用效果良好。我们向大家推荐的这种小牛血清制作方法 具有设备简单、操作简便、成本低、见效快等优点，适合于 相关高等院校和研究院所采用。 图1采牛血清示意图 1材料 小牛(出生1一3天内)。 加液口 2器材及用物 2.1简易手术台(用于固定牛)，线绳若干，棉球若干， 2%碘酒，75%的酒精，消毒钳一把。 2.2 消毒器械包:孔巾一条，巾钳4把，手术刀一把， 血清 不锈钢滤器 14cm直止血钳2把，14cm弯止血钳2把，14cm尖手术剪 1把，14cm圆手术剪1把，眼科剪1把，棉球、纱布若干。 2.3采血包:3000m1采血瓶1个，止血钳2把。 2.4 消毒加压式微孔滤膜滤器一台，容量为2000m1，使 用0.2um孔径的滤膜一张，棉球若干，消毒钳一把。 2.5 收集血清包:lOml具塞离心管数支(根据血清量的 多少准备)，吸管，吸头若干，250n-d,100ml盐水瓶数个， 25m1培养瓶一个(用于试培)。 2.6 1000m1三角烧瓶2个(用于接血清)。 3 步骤 3.1将小牛侧卧在手术台上，肩部垫高，使头后仰，充分 图2 正压不锈钢过滤装里示意图 暴露颈前部。用绳子固定四肢关节部位，用清水打湿颈 钳夹住近心端，再用另一把止血钳夹住远心端，两端相距 部皮肤，剪去颈部毛，用碘酒，酒精消毒皮肤。 4cm左右。将75%酒精棉球拧干后，消毒此处动脉，于血 收稿 日期:2001一12一22 万方数据 第 19卷第4期 生 物 学 杂 志 Vol.19 No.4