实验一斐林试剂置换法测定还原糖含量.pptVIP

实验一斐林试剂置换法测定还原糖的含量;一、实验原理;斐林试剂中酒石酸钾钠铜是一种氧化剂，反应的终点可用次甲基蓝作指示剂，在碱性、沸腾环境下还原呈无色。根据斐林试剂完全还原所需的还原糖量，计算出样品还原糖量。;二、试剂与材料;4、碱式滴定管 5、样品溶液：待测G液 样品1：稀释20倍，1000ml /班 样品2：稀释50倍，1000ml /班 6、电炉 ;三、操作方法;B 电炉上加热至沸，并保持微沸2分钟，加2滴1%次甲基蓝溶液，趁沸以每两秒1滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液用0.2%标准G滴定至蓝色消失，有红棕色沉淀，溶液清亮为终点止。记录耗用的G量为V0,必须在1min内完成。 注意：还原的次甲基蓝易被空气中的氧氧化，恢复成原来的蓝色，所以滴定过程中必须保持溶液成沸腾状态，并且避免滴定时间过长。 ;2、定糖预备试验 同1法取斐林试剂，加10ml样品液，摇匀于电炉上加热??沸，保持微沸2分钟，加2滴1%次甲基蓝，用0.2%G滴定至蓝色消失。记录耗用的G量为V1;3、样品中还原糖测定 同上法吸取斐林试剂加10ml样品液(预先稀释)，补加（V0—V1）ml水，并从滴定管中预先加入（V1-1）ml 0.2%G，摇匀至电炉上加热至沸，保持2min微沸，加入2滴1%次甲基蓝，继续用G滴定至蓝色消失。记录消耗的标准G体积为V毫升。;四、结果计算;五、注意事项;分别用葡萄糖、果糖、乳糖、麦芽糖标准品配制标准溶液分别滴定等量已标定的费林氏液，所消耗标准溶液的体积有所不同。证明即便同是还原糖，在物化性质上仍有所差别，所以还原糖的结果只是反映样品整体情况，并不完全等于各还原糖含量之和。如果已知样品只含有某种还原糖，则应以该还原糖做标准品，结果为该还原糖的含量。如果样品中还原糖的成分未知，或为多种还原糖的混合物，则以某种还原糖做标准品，结果以该还原糖计，但不代表该糖的真实含量。;五、分析讨论 六、思考题： 1、查阅资料还原糖测定检测方法有哪些？其原理是什么？ 2、总结本实验方法检测还原糖应注意哪些事项？