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淀粉液化芽孢杆菌β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因的克隆及表达
生 物 工 程 学 报 Chin J Biotech 2009, April 25; 25(4): 542-548
journals.im.ac.cn Chinese Journal of Biotechnology ISSN 1000-3061
cjb@im.ac.cn © 2009 Institute of Microbiology, CAS CSM, All rights reserved
食品生物技术
β-1,3-1,4-
1,2 1,2 2 2 2 1,2
李永仙 , 谢焱 , 朱林江 , 张一心 , 顾国贤 , 李崎
1 , 214122
2 , 214122
: 为了比较不同的表达系统对β-1,3-1,4- 葡聚糖酶基因(bgl) 的效果, 本研究将高产β-1,3-1,4- 葡聚糖酶的淀粉液化
芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens BS5582 的bgl 基因(GenBank Accession No. EU623974)克隆到3 种不同的质粒载体中,
即构建pEGX-4T-1-bgl 、pET20b(+)-bgl 和pET28a(+)-bgl 重组质粒。比较了pEGX-4T-1-bgl 在不同Escherichia coli 宿主
中表达效果, 以及 pET20b(+)-bgl 和 pET28a(+)-bgl 在 E. coli BL21(DE3) 中的表达效果。结果表明, E. coli
BL21(DE3)-pET28a(+)-bgl 能够表达最高的重组β-1,3-1,4- 葡聚糖酶酶活, 其总酶活可达(322.0±8.8) U/mL, 是出发菌在最
适摇瓶发酵条件下产酶活的 40.1% 。对该重组菌的产酶条件进行了分析, 结合 IPTG 和乳糖协同的诱导作用, 在基础产
酶培养基中产最高总酶活为(1883.3±45.8) U/mL, 表明其具有良好的工业应用价值。
: 淀粉液化芽孢杆菌, β-1,3-1,4- 葡聚糖酶, 克隆表达, 大肠杆菌
Optimization of cloning and expression of β-glucanase gene
from Bacillus amyloliquefaciens
1,2 1,2 2 2 2 1,2
Yongxian Li , Yan Xie , Linjiang Zhu , Yixin Zhang , Guoxian Gu , and Qi Li
1 Key Laboratory of Industrial Biotechnology, Ministry of Education , Wuxi 214122, China
2 Laboratory of Brewing Science and Technology , School of Biotechnology, Jiangnan University , Wuxi 214122, China
Abstract: To compare of performance of β-1,3-1,4-glu
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