血型识别和十字血.pptVIP

血型鉴定与交叉合血;血型的定义及分类;血型鉴定;1.1 ABO血型鉴定 实验原理： 根据红细胞上有或无A抗原或B抗原，将血型分为A型、B型、AB型及O型4种。利用红细胞凝集试验，通过正、反定型准确鉴定ABO血型。所谓正定型，是用已知抗-A和抗-B分型血清来测定红细胞上有无相应A抗原或/和B抗原；所谓反定型，是用已知A细胞和B细胞来测定血清中有无相应的抗-A或/和抗-B。 ; 试剂和材料?： 1) 抗-A(B型血)、抗-B(A型血)及抗-A+B(O型血）分型血清，购置商品试剂。? 2) 5％A、B及O型试剂红细胞盐水悬液。 ? 3) 受检者血清。? 4) 受检者5％红细胞盐水悬液。 ;ABO血型鉴定的检测方法;? ? 4＋ 红细胞凝集成一大块，血清清晰透明。? 3＋? 红细胞凝集成数小块，血清尚清晰。 ? 2＋? 红细胞凝块分散成许多小块，见到游离红细?胞。 1＋? 肉眼可见大颗粒，周围有较多游离红细胞? 土? 镜下可见数个红细胞凝集在一起，周围有很多游离红细胞? MF ? 混合凝集外观(mixed?field)是指镜下可见少 数红细胞凝集，而极大多数红细胞仍呈分散分布。? 一 ?表示阴性，镜下未见凝集，红细胞均匀分布。? ? ; 2.玻片法? （1)?取清洁玻片1张(或白瓷板1块)，用蜡笔划成方格，标明抗-A、抗-B、抗A+B,分别用滴管滴加抗-A、抗-B、抗-A+B分型血清1滴于标明的方格内，再各加受检者2％红细胞悬液1滴，混和。? （ 2)?另取洁净玻片一张(或白瓷板1块)，用蜡笔划成方格，标明A细胞、B细胞和O细胞，用滴管各加受检者血清1滴，再分别用滴管滴加A、B和O型试剂红细胞悬液1滴。 （ 3)?将玻片(或白瓷板)不断轻轻转动，使血清与红细胞充分混匀，连续约15min，以肉眼观察有无凝集(或溶血)反应。玻片作试验时，也应用低倍镜观察结果。 ;4）结果判定? ABO血型正反定型结果? 注释：十为凝集；一为不凝集。 分型血清+受检者RBC? 受检者血型 受检者血清+试剂RBC 抗-A? 抗-B? 抗-A十B? ? A细胞 B细胞 O细胞 十? ─? 十? A? ─? 十? ─? ─? 十? 十 ?B? 十 一? ─? ─? ─ ?─? O? 十? 十?? ─ 十? 十? 十? AB ?─? ─? ─? ;5）注意事项 （1）分型血清质量性能要符合要求，用毕后应放置冰箱保存，以免细菌污染。? （2） 试剂红细胞以3个健康者同型新鲜红细胞混和，用生理盐水洗涤3次，以去除存在于红细胞表面的血清中成分及可溶性抗原。? （3）试管、滴管和玻片必须清洁干燥，防止溶血。? （4） 操作方法应按规定，一般应先加血清，然后再加红细胞悬液，以便容易核实是否漏加血清。? ; （5) 按理IgM抗-A和抗-B与相应红细胞的反应温度以4℃为最强，但为了防止冷凝集现象的干扰，一般仍在室温(20-24℃)内进行试验，37℃可使反应减弱。? （6) 离心时间不宜过长或过短，速度不宜过快或过慢，以防假阳性或假阴性结果。 ? （7) 观察时应注意红细胞呈特异性凝集、继发性凝固以及缗钱状排列的区别。? （8) 判断结果后应仔细核对、记录，避免笔误。?; 正反定型结果不一致的原因 主要有以下三个方面： 一、技术性方面问题 二、红细胞方面的问题 三、血清方面的问题 ;常见情况如下： 1)?分型血清效价太低、亲和力不强。若抗-A血清效价不高，可将A亚型误定为O型，A