利用荧光原位交技术检测RNA聚合酶Ⅲ在CHO细胞核中的转录位点.pdfVIP

型旦茎堂堕竺墨窒垫查堡型坠垒墨盒耻垄cHo细胞核中的转录位点 第2页共51页 摘 要 f、 I真核生物的细胞核中具有三种不同的RNA聚合酶，分别是RNA聚合酶I、 I负责催化合成5．8s、18s和28S 合成，而RNA聚合酶III则负责催化5SrRNA、tRNA、多数的SnRNA以及某 些病毒基因(如VA基因)等的转录。 早在80年代初期人们即对这三种RNA聚合酶在细胞核中的转录位点进行 了研究。当时的研究结果显示：RNA聚合酶I的转录发生在核仁内，RNA聚合 II的转录位点已经研究得较为透彻并且也得到了大家的公认，但是自90年代以 来随着研究技术方法的不断改进和发展，在RNA聚合酶III转录位点的确认方 面却存在着不小的分歧。近几年，有许多学者相继提出了RNA聚合酶III有可 能在核仁区域内发生转录的观点，但是这一观点至今还没有得到直接的实验证据 的支持。y 本实验以中国仓鼠卵巢细胞(CHO)为实验材料，利用基因转染、荧光原 位杂交并结合激光共聚焦显微镜观察的方法，在DNA和RNA水平上分别对RNA 聚合酶III的转录位点和转录子的分布进行了检测。结果表明，由RNA聚合酶 III负责转录