免疫抑制剂对肝癌增殖、侵犯、转移及淋巴细胞亚群影响.pdfVIP

关键词 肝移植；肝癌； FK506；大鼠；增殖；侵犯；转移；淋巴细胞亚群；MMF； RAP 中文摘要 免疫抑制剂对肝癌增殖、侵犯、转移及淋巴细胞亚群的影响 目的肝移植足目前治疗肝癌的有效方法，肝移植术后免疫抑制剂的使用足肝 癌复发的重要因素，但研究多为体外实验，主要针对CsA。作为目前肝移植领域 的一线免疫抑制剂，FK506在体内肝癌形成和发展中的作用尚无研究报道，针对 肝癌肝移植患者如何采用适宜免疫抑制方案以减少肝癌复发亦无理论基础。本中 心采用大鼠移植性肝癌模型初步探讨免疫抑制剂FK5．06、MMF、RAP对人类原 发性肝癌增殖及转移的影响及可能机制。实验一：包括利用大鼠移植性肝癌模 型探讨不同剂量FK506对肝癌增殖、侵犯及转移的影响及对移植性肝癌大鼠淋巴 细胞亚群的影响两部份。目的针对目前主要免疫抑制剂FK506的不可豁缺性，探 免疫抑制剂对大鼠移植性肝癌的对照研究。为选择合理的肝癌后肝移植免疫抑制 剂方案提供理论依据。 方法实验一：walker--256细胞株成瘤的癌组织块种植wistar大鼠肝左叶内， Fk506(1 测量肝癌体积，观察毗邻肝脏三角叶侵犯、脾及肺转移情况，流式细胞仪测定癌 建移植性肝癌模型。设立空白对照，正常剂量Fk506(1 mg·kg-1．d。)、MMF(20 mg·kg-I．d．1)、RAP(O．5mg．kfI．d。‘)四组，共72只。7、14、21天测量肝癌体积， 观察毗邻肝脏三角叶侵犯、脾及肺转移情况，流式细胞仪测定癌细胞增殖。 结果 实验一：两种FK506剂量组肝癌体积和三角叶侵犯病灶数在7、14天显著增 加(P0．05)。7天正常剂量组、14天两种剂量组肝癌细胞S期百分比和增殖指数 2 (PI)显著上升(Po．05)。14天正常剂量组脾转移中位数高于对照组和低剂量组： 2l天两剂量组脾转移中位数亦高于对照组。7、14天低莉量FK506组肺转移灶 中位数小于高剂量组(Po．05)，14天两剂量组大于开始肺转移的对照组(Po．05) CD3：空白对照组与低剂量FK506均先增加后减少。与正常大鼠比较，空白 对照组大鼠术后7天显著增加。与空白对照组比较，正常剂量组显著减少。 CD4+T细胞：三组大鼠术后呈下降趋势。与正常大鼠比较，空白对照组大 鼠术后7天显著增加，其后逐渐减少，并从中期始低于正常大鼠。正常剂量FK506 三个时段均低于对照组，低剂量FK506三个时段与对照组比较无显著性差异， 但早、中期高于正常剂量。 CD8+T细胞：低剂量FK506中期高于对照组。 CD4／CD8：三组大鼠术后呈下降趋势。空白对照组在晚期显著低于正常大鼠。 正常剂量FK506在早中期低于对照组，低剂量FK506中期低于对照组。 NK：空白对照组、低剂量组种植肿瘤早期先增加后减少；正常剂量组先增加 后减少，晚期又增加。和正常大鼠比较，空白盐水组在三个时期均大于正常大鼠。 正常剂量组NK细胞百分比在晚期大于空白盐水组。 CD25：空白对照组在早期减少，其后逐渐恢复。两FK506组CD25+细胞保 持低水平状态，并在晚期低于空白对照组。 CD25+NK与正常大鼠比较，空白对照组无无显著性差异。但正常剂量组 CD25+NK细胞在种植肿瘤早中期期大于空白对照组。 实验二：肿瘤体积MMF组、RAP组在同时期均显著小于对照组及FK506组： 著低于对照组，RAP在三个时期均低于对照组。种植后MMF、RAP组肿瘤细 胞对正常I临近肝组织的侵犯在三个时期均少于对照组及Fk506组。Fk506组7天 既出现肺转移，14天各组均开始出现肺转移，其中Fk506中位数显著大于对照 组。14天对照组、FK506组开始出脾转移：2I天三组均出现脾转移其中Fk506 中位数显著大于对照组，MMF组、RAP组中位数小于对照组。 结论FK506促进早期大鼠种植性肝癌增殖、侵犯及转移。低剂量组肺转移 灶比正常剂量数量少。减少FK506用量可能有助于减少肝外癌转移。未发现不 同剂量Fk506对肝癌增殖、侵犯影响有差异。 足够剂量的FK506对机体成熟CD4细胞的不间断抑制，以CD4+T细胞不断减 少，这可能足同时期肝癌侵犯和转移易发生的重要原因。低剂量FK506与正常剂 量相比，即使存在瓣瘤，初期对全身免疫系统的影响