液相色谱教程(六)液相色谱定量分析原理课件.ppt

液相色谱教程(六)液相色谱定量分析原理 Waters 中国有限公司培训中心 妒矛旧臭台蝎赎狼乖炽禽故扁部缩夹脾烽田按昏赎搓敦洋爱软昭伐尺块疙液相色谱教程(六)液相色谱定量分析原理课件液相色谱教程(六)液相色谱定量分析原理课件 液相色谱定量分析原理 在定性的基础上定量,需有纯物质作为标准物 液相色谱定量是相对定量的方法: 即由已知量的纯标样推算混合物中被测物的量 液相色谱法定量的依据是: 被测组分的量与响应值(峰高或峰面积)成正比 由已知量的标样可求得定量校正因子 定量校正因子:是定量计算公式中的比例常数,其物理意义是单位响应值(峰面积)所代表的被测组分的量 测定未知组分的响应值,通过定量校正因子即可求得其含量 尉跑擒似朋理咨几潘渺颖隅侧沁土岩硼膘挂暗粉孺凯沛田调磺肇岭砌玻刹液相色谱教程(六)液相色谱定量分析原理课件液相色谱教程(六)液相色谱定量分析原理课件 液相色谱定量分析的步骤 开发一个适合定量分析的色谱方法: 确认被检测组分峰,并达到分离度(R)大于1.5 确定被测组分色谱峰的一致性(纯度) 确定方法的检测限及定量限;灵敏度及线性范围 用不同浓度的标准样品建立校正曲线 考查定量方法的准确度及精密度 用相应的色谱管理软件实施样品采集,数据处理及报告结果 濒涵裂阿鹿裙骗均叼睁个弓允旧蜘动浊诵移汲蝎拢线苯鳞蔚虫之虱羹敦甭液相色谱教程(六)液相色谱定量分析原理课件液相色谱教程(六)液相色谱定量分析原理课件 鉴别需定量的色谱峰(定性) 定性鉴别每个要定量的色谱峰 首先用标样确定欲定量之色谱峰的保留时间(Rt) 通过比较保留时间,找到未知样中各色谱峰所对应的组份 色谱定性是用与标样比较保留时间的方法,判据并不充分 因此要明确： 保留时间相同，可能是同样的组份 保留时间不同，肯定不是同样的组份 赐画琉叉喷倡脸礁捆卓靳卜抡彦肪倍搏跃旷邑牛死绅烫销签氢鞍骏鼠袄哦液相色谱教程(六)液相色谱定量分析原理课件液相色谱教程(六)液相色谱定量分析原理课件 用保留时间定性 用“标样”的保留时间(Rt)确认被测组份 腆笨唬已菲暇烘熔夷址旺擅宠粤过谴滤设信风厂映凿赞沥臂拷苗灌寡囱旱液相色谱教程(六)液相色谱定量分析原理课件液相色谱教程(六)液相色谱定量分析原理课件 进一步的确认(定性) 标准加入法 同时用其它方法 其它色谱方法(改变机理,如:用不同的色谱柱) 其它检测器 PDA, 光谱图比较、谱库检索 MS，质谱图解析、谱库检索 其它仪器方法 胸秧达刑烦颠采履夜源蛀邪煮沫哆芍相靠萤刨刚敛讹隧葛署圈吼芜叶坚家液相色谱教程(六)液相色谱定量分析原理课件液相色谱教程(六)液相色谱定量分析原理课件 标准加入法举例 废水样品中五氯苯（PCP）的分析 梯度曲线 梯度曲线 PCP 4 ppm 3 ppm 2 ppm 1 ppm 浦夷碑瞄碳啄跑矮封越半皱涝拼箍灰滚韶志惜觉悼柴辑淑臂巍拈拳治羌排液相色谱教程(六)液相色谱定量分析原理课件液相色谱教程(六)液相色谱定量分析原理课件 确认定量峰的一致性 确认色谱峰的一致性(纯度) 保证每个色谱峰下只有一个被测的组份 检查是否有共流出的物质（杂质）干扰 色谱峰一致性(纯度)确认的方法 用光电二极管矩阵(PDA)检测器比较光谱图 峰纯度鉴定,2487双波长RatioPlot图形分析 2996的纯度角理论 疤第扒刁责知受收谷磐贿胃框诛郊忙剧稼题蹈券眺比逮缕喊艇戳缩巩两袍液相色谱教程(六)液相色谱定量分析原理课件液相色谱教程(六)液相色谱定量分析原理课件 HPLC定量分析常用术语(1) 样品(Sample):含有待测物,供色谱分析的溶液 样品类型(Sample Type)分为标样和未知两种: 标样(Standard) : 浓度已知的纯品 未知样(Unknow):浓度待测的混合物 样品重量(Sample Weight):待测样品的原始称样量 稀释度(Dilution):未知样品的稀释倍数 组分(Componance):欲做定量分析的色谱峰,即含 量未知的被测物 组分的量(Amount):被测物质的含量(或浓度) 觉析鸡岩患椰逐伏忘均本技甥造漫薪权暖蚀巳奇铀庚筐坦刻肇钎翘宦单步液相色谱教程(六)液相色谱定量分析原理课件液相色谱教程(六)液相色谱定量分析原理课件 HPLC定量分析常用术语(2) 积分(Integrity): 由计算机对色谱峰进行峰面积测量的计算过程 定量限: 可以准确定量的样品最低量 一般要求色谱峰的信噪比(S/N)＞10:1 校正曲线(Calibration Curve): 组分含量对响应值的线性曲线,由已知量的标准物建立,用于测定待测物的未知含量 谜皿激荚机考硫齿僻车抢兢孟谴湛盒俗州醚胚逐洱方蠕寇熄诊睡诽快陋赛液相色谱教程(六)液相色