滇杨增殖及生根培养探究.docVIP

滇杨增殖及生根培养探究摘要：以滇杨（Ｐｏｐｕｌｕｓ ｙｕｎｎａｎｅｎｓｉｓ Ｄｏｄｅ）组织培养获得的不定芽为原材料进行增殖培养和生根培养，考察培养基中激素浓度对不定芽增殖和试管苗生根的影响。结果表明，ＭＳ＋０．１ ｍｇ／Ｌ ６－ＢＡ＋０．０２ ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ是适合滇杨不定芽增殖的培养基。１／２ＭＳ培养基中添加０．０２ ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ有利于试管苗的生根。 关键词：滇杨（Ｐｏｐｕｌｕｓ ｙｕｎｎａｎｅｎｓｉｓ Ｄｏｄｅ）；组织培养；增殖；生根 中图分类号：Ｓ７９２．１１８；Ｓ７２３．１＋３２ 文献标识码：Ａ 文章编号：0439－８114（２０12）15－3366-03 Ｓｔｕｄｙ ｏｎ Ｍｕｌｔｉｐｌｉｃａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｒｏｏｔｉｎｇ Ｃｕｌｔｕｒｅ ｏｆ Ｐｏｐｕｌｕｓ ｙｕｎｎａｎｅｎｓｉｓ ＸＩＮ Ｐｅｉ－ｙａｏａ，ｂ，ＬＩＵ Ｙａｎｂ，ＳＵＮ Ｚｈｅｎｇ－ｈａｉｂ，ＺＨＯＵ Ｊｕｎａ，ｂ，ＴＡＮＧ Ｊｕｎ－ｒｏｎｇｂ，ＨＥ Ｃｈｅｎｇ－ｚｈｏｎｇａ，ｂ，ＤＵＡＮ Ａｎ－ａｎａ （ａ． Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｆｏｒ Ｆｏｒｅｓｔ Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ Ｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｕｓｅ ｉｎ ｔｈｅ Ｓｏｕｔｈｗｅｓｔ Ｍｏｕｎｔａｉｎｓ ｏｆ Ｃｈｉｎａ， Ｍｉｎｉｓｔｒｙ ｏｆ Ｅｄｕｃａｔｏｉｎ； ｂ． Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｂｉｏｄｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｏｎ ｉｎ Ｓｏｕｔｈｗｅｓｔ Ｃｈｉｎａ， Ｓｔａｔｅ Ｆｏｒｅｓｔｒｙ Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ， Ｓｏｕｔｈｗｅｓｔ Ｆｏｒｅｓｔｒｙ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｋｕｎｍｉｎｇ ６５０２２４， Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｐｌａｎｔ ｇｒｏｗｔｈ ｒｅｇｕｌａｔｏｒ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｎ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｍｕｌｔｉｐｌｉｃａｔｉｏｎ ａｎｄ ｒｏｏｔｉｎｇ ｗｅｒｅ ｓｔｕｄｉｅｄ ｕｓｉｎｇ ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ ｂｕｄｓ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｉｎ ｔｉｓｓｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅ ｏｆ Ｐｏｐｕｌｕｓ ｙｕｎｎａｎｅｎｓｉｓ Dode ａｓ ｒａｗ ｍａｔｅｒｉａｌ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ＭＳ＋０．１ ｍｇ／Ｌ ６－ＢＡ ＋０．０２ ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ ｗａｓ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｕｍ ｍｅｄｉｕｍ ｆｏｒ ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ ｂｕｄｓ ｍｕｌｔｉｐｌｉｃａｔｉｏｎ； ａｎｄ １／２ＭＳ＋０．０２ ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ ｗａｓ ｇｏｏｄ ｆｏｒ ｒｏｏｔｉｎｇ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： Ｐｏｐｕｌｕｓ ｙｕｎｎａｎｅｎｓｉｓ Ｄｏｄｅ； ｔｉｓｓｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅ； ｍｕｌｔｉｐｌｉｃａｔｉｏｎ； ｒｏｏｔｉｎｇ 滇杨（Ｐｏｐｕｌｕｓ ｙｕｎｎａｎｅｎｓｉｓ Ｄｏｄｅ）属杨柳科杨属青杨派树种，又名云南白杨，具有适应性较强、生长较快、成材较早、分布海拔变幅大（１ ３００～３ ２００ ｍ）、易于繁殖等特点，是中国乃至世界少有的分布于低纬度高海拔地区的宝贵杨树资源，也是中国西南地区特有的一种乡土树种［１］。由于滇杨主要分布在云南、四川及贵州等环境复杂、植物种类繁多的地区，而且人们对其认识程度各异，使得滇杨的种质资源保护、开发与利用等工作一直没能得到足够的重视［２］。随着胡杨派、白杨派、青杨派、黑杨派以及大叶杨派中的多个种或杂种离体培养再生体系的成功建立［３］，使得利用杨树组织培养对其种质进行保存以及创新成为现实。本研究将滇杨嫩茎诱导的不定芽接种在不同的增殖和生根培养基上，探讨滇杨组织培养中较佳的增殖及生根培养方案，可为进一步对滇杨进行种质资源的保存、诱变育种以及转基因育种等研究提供理论指导与技术保障。 １ 材料与方法 １．１ 材料 利用已筛选出的分化培养基［４］，以滇杨嫩茎为外植体诱导不定芽，以诱导出的不定芽作为试材。 １．２ 方法 １．２．１ 增殖培养 以ＭＳ为基本培养基［５］，附加不同浓度的细胞分裂素６－ＢＡ和生长素ＮＡＡ（表１），调ｐＨ至６．０。培养温度（２５±２） ℃、光照１ ５００～２ ０００ ｌｘ、光照时间１２ ｈ／ｄ。每处理接种２０瓶，每瓶接种４个不定芽，重复３次。接种后每隔２ ｄ观察和记录不定芽的生长情况。以增殖系数及试管苗生长状况为指标，筛选出滇杨不定芽增殖培养的较优方案。１．２．２ 生根培养 生根培养基以１／２ＭＳ为基本培养基［５］，添加３０ ｇ／Ｌ蔗糖和４．５ ｇ／Ｌ琼脂，再加入不同浓度的ＮＡＡ（０、０．０１、０．０２、０．０５ ｍｇ／Ｌ），调ｐＨ至６．０。将增殖培养中生长健壮的试管苗切除基部的愈伤组织，接种于事先配制好的生根培养基上，培养条件同增殖培养，每处理