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平颏海蛇！#$在大肠杆菌中的融合表达
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年 月
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平颏海蛇!#$ 在大肠杆菌中的融合表达
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杨文利 叶兰汀 邹 兰 汪 枫 徐安龙
1
（中山大学生命科学学院生化系 海洋生物功能基因组开放实验室 广州 31#:3 ）
中国科技大学生命科学院 合肥 ）
（ 0##:
摘 要：将编码平颏海蛇磷脂酶 的基因（ ）分别克隆于硫氧环蛋白基因融合表达载
) !# 62
体 和 的 和 基因的 末端，构建符合读码框的融合表达载体
E4F=G=,H E4IJ GK6-?9) $%# 0L
和 。 下经 诱导， 融合蛋白在两种原核系统中均能获
E4F=G=,H6 !# E4IJ6 !# 3M NK4O KP)
得较高表达，但KP) 在E4IJ 系统下的表达量和蛋白溶解性优于E4F=G=,H 系统。将两种系
统下的表达产物进行金属螯合亲和层析纯化， 融合蛋白的纯度可达 以上，而
4?96KP) $3 Q
GK64?96KP) 不表现出对介质的亲和性，难以得到纯化。由此，将E4IJ6KP) 载体系统确立为
进一步大量表达和纯化的载体系统。
关键词：平颏海蛇磷脂酶) ，融合表达，亲和层析
中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ）
R:$/ ) ###16/#2 ## #!6#!##6#/
蛇毒磷脂酶 （ ， ， ）广泛存在于各种蛇中，属分泌型蛋
) EF,EF’=E8,5 ) ;H0 ( 1( 1(! KP)
白酶，由一类结构相似、分子量在 左右的蛋白家族组成，一般含有 至 对二硫
1!ST
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