两种培养基生产布氏杆菌病猪型二号活疫苗的对比试验.pdfVIP

试 验 研 究 两种培养基生产布氏杆菌 病猪型二号活疫苗的对比试验 陈欢欢 (甘肃 中牧股份兰州生物药厂 。兰州 730046) 摘 要：培养基是动物细菌性疫苗生产的重要物质基础。马丁肉汤培养基是生物制品生产领域常用的培养基，在疫苗 制造、细菌培养、分离、鉴定等方面发挥着不可或缺的作用。按照 《兽用生物制品规程》的要求以新鲜牛肉汤为主要原 材料制作的马丁肉汤培养基含有丰富的天然营养成分，一直是常规生产布氏杆菌疫苗用的传统培养基，马丁肉汤制作 工艺繁琐复杂、费时费力，批次间离散度大、浪费大，针对这些问题本试验对猪种布鲁氏菌2号弱毒株C79—2用马丁 干粉培养基和 自制马丁汤做对比实验，结果发现用马丁干粉培养基培养布氏杆菌，每毫升 中的活茵数都比用新鲜马 丁汤培养基多，其成品的安检、效检均一次通过，可用于布鲁氏茵病猪型二号活疫苗的生产。使用马丁干粉培养基可 降低成本，增加效益。 关键词 ：马丁干粉培养基；自制马丁肉汤培养基；布鲁氏菌；活菌数 DO1：10．396~J．1SSN．1671-6027．2012．O3．O11 布鲁氏菌病是由布鲁氏菌属细菌引起的多种家畜和人 1．2 自制马丁肉汤培养基 由本厂培养基室按 规《程》中有 的细菌性共患性全身传染病 ，本病流行于世界各地 ，世界动 关规定进行操作。 物卫生组织 (OIE)已将其列为 B类动物疫病 ，我国将其列为 1．3 马丁干粉培O-I,-北京中龙生物科技总公司中国兽医 二类动物疫病 ，严重危害畜牧业的持续发展和人类的健康。 药品监察所提供。 为了预防此病的发生，加强对布鲁氏菌病的防治 ，以期达到 1．4 肝汤琼脂斜面、胰蛋 白际琼脂平板、蛋白脒水、葡萄糖发 在全国范围内长期基本控制的目标，我国每年都要生产大量 酵管、硫 乙醇酸盐 由本厂培养基室按 兽《用生物制品规程》 的布氏杆菌病弱毒活疫苗。培养基是动物细菌性疫苗生产最 制造。 重要的物质基础，其质量的好坏对细菌培养的成败起着至关 2 方 法 重要的作用。目前生产此疫苗所用的培养基主要是使用传统 2．1 小量试验 的马丁肉汤培养基 ，该培养基需用大量的牛肉及猪 胃，现阶 2．1．1 参照 《中华人民共和国兽用生物制品质量标准》的要 段我国大多数兽用生物制品厂家都是 自己购买新鲜猪 胃和 求制备一级种子备用。 牛肉等直接原材料进行加工制成细菌性培养基。动物性原材 2．1．2 把装有 300mL马丁干粉培养基的500mL瓶作为试验 料由于饲料来源、饲料成分和养殖条件的不同，加之各种疾 瓶 ：配制好的自制马丁肉汤培养基调整pH值6．4～6．8分装 病隐患，其肉质差异很大。特别是现在市售牛肉大多采用快 300mL于 500mL磅瓶中作为对照瓶。 速饲养的肉牛 ，不如以前牛肉的质量好，且在市场上质量不 2．1_3 以等量的一级种子分别接种到试验瓶和对照瓶 ， 能保证一致 ，以及原材料消化时间、制作工艺这一系列不稳 36—37oc静止培养36h，在培养期间每隔 12h取样做纯粹检 定的因素，致使所制的培养基质量也不尽一致，最终影响到 验及数菌，并观察培养基的色泽等。用同样的方法这样的试 培养结果 ，在加上在马丁肉汤制作工艺繁琐复杂 、费时费力， 验再重复做2次。 批次间离散度大 、浪费大 ，针对这些问题对设计研制一种既 2．2 培养扩大试验并配苗 操作简单方便 ，又不用牛肉、猪 胃等动物性原料的半合成培 在小量试验取得明显成效的基础上 ，进行大培养罐试验 养基 ，其配制容易、使用方便 、成本较低，采用半合成培养基 2．2．1 参照 《中华人民共和国兽用生物制品质量标准》的要 生产的疫苗其下游工艺(浓缩、纯