用亲水性的C16硅胶反相色谱柱分离测定血清样品中的雌激素.PDF

第 33卷 分析化学 ( FENX I HUAXU E) 　研究报告 第 7期 　　　　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　　 2005年 7 月 Ch ine se Jou rnal of A nalytical Chem istry 9 13 ～9 16 用亲水性的 C 硅胶反相色谱柱 16 分离测定血清样品中的雌激素 1 1 1 1 2 1 1 蔡亚岐 　王 　玲 　梁立娜 　刘京生 　史亚利 　牟世芬 　江桂斌 1 (中国科学院生态环境研究中心环境化学与生态毒理学国家重点实验室 ,北京 100085) 2 (北京科技大学化学系 ,北京 100083) β α 摘 　要 　将亲水性较强的 C 硅胶反相色谱柱应用于血清样品中 雌二醇 、雌三醇 、雌酮和 17 乙炔基雌二 16 醇的分离 。实验对分离条件进行了优化 ,得到的最佳色谱条件是 :柱温 40 ℃,流速 1 mL /m in, 以 40% 乙腈水 溶液作等度洗脱 。在此条件下 4种雌激素可在大约 26 m in 内实现基线分离 ,得到的 4 个色谱峰峰型对称 。 β α 分离后的 4种雌激素用紫外检测器在 200 nm 处进行测定 ,方法对 雌二醇 、雌三醇 、雌酮和 17 乙炔基雌二 醇的检出限分别为 0. 024、0. 015、0. 0 12 和 0. 0 16 m g/L ;校正曲线的线性范围为 2 ～3 个数量级 ,相关系数为 β α 0998 以上 。方法应用于血清样品的测定 , 雌二醇 、雌三醇 、雌酮和 17 乙炔基雌二醇的标准加入回收率分 别为 96. 3% 、103. 7% 、100. 1%和 95. 2% 。 关键词 　雌激素 ,血清 ,高效液相色谱 ,紫外检测 1　引　　言 雌激素包括天然雌激素和人工合成雌激素 ,其在人体的生理功能调节和各种医疗实践中具有重要 β 作用 。 雌二醇是最为常见的天然雌激素 。雌三醇和雌酮则是雌二醇的主要代谢物 ,具有较强的雌激 α 素活性 。17 乙炔基雌二醇是人工合成的强雌激素药物 ,主要用作口服避孕药的主要成分 ,可表现出比 β 17 雌二醇 、雌三醇和雌酮更强的雌激素活性 。这些雌激素除了作为避孕药的主要成分外 ,还可用于治 疗调节月经不调和绝经综合症 、生理性雌激素缺乏症 、前列腺癌和绝经期妇女乳腺癌等疾病 。也有研究 证明这些雌激素药物的滥用具有一定的致癌性 。因此准确测定血清中的这些雌激素的浓度对生理健康 状况的判断、疾病的诊断和药效研究具有重要意义 。目前 ,测定这类雌激素药物的分析方法主要有生物 法 [ 1～6 ] 和气相色谱 质谱联用法 [ 7～12 ] 。生物法的主要缺点是不能同时测定多种雌激素物质 ;气相色谱 质谱联用法的主要缺点则是在测定前需要对样品进行衍生 。高效液相色谱应用于这类雌激素物质的分 离具有不用衍生直接测定的优点 ,但其应用受到其低灵敏度和选择性的严重制约 [ 2 , 6, 13, 14 ] 。而且 ,这些