团头鲂与翘嘴红鲌杂交后代的受精细胞学过程和相关分子生物学研究.pdfVIP

分类号 密级 学校代码 !Q5垒2 学号 2Q1QQ21垒153墨 团头鲂与翘嘴红鲔杂交后代的受精细胞学 过程及相关分子生物学研究 of Studiesonfertilization cytology betweenBluntSnoutBreamand hybrids Topmou thCulterandtheftmolecular biological characteristics 研 究 生 姓 名 康雪伟 指导教师姓名、职称 刘少军教授 学 科 专 业 发育生物学 研 究 方 向 水生经济动物繁殖与育种 湖南师范大学学位评定委员会办公室 二零一三年五月 摘 要 远缘杂交是一种重要而且有效的鱼类遗传育种方法，通过这种方 法可以将染色体组从一个物种转入另一个物种，进而导致杂交后代在 基因型和表现型方面的改变，能有效的开发和整合不同鱼类优质遗传 资源，在鱼类遗传育种和进化生物学研究方面均具有重要价值。本实 验室以团头鲂和翘嘴红鱼自为亲本进行属间杂交，正反交得到了不同的 杂交后代。以团头鲂为母本、翘嘴红鲐为父本正交产生的F，代成鱼 鲐为母本、团头鲂为父本产生的Fl代成鱼只有二倍体鲐鲂(2n=48)。 正反交产生的两种二倍体鱼雌雄正常可育，分别白交后得到两性可育 的二倍体F2代(2n=48)。杂交后代均继承了双亲的遗传特征，体现 了杂种优势。本研究对其正交受精细胞学过程和正反交后代相关分子 生物学特征进行了深入探讨，具体内容如下： 1．对以团头鲂为母本、翘嘴红鲔为父本杂交产生F1代的受精细胞 学过程进行观察发现：在该杂交组合受精过程中，精子入卵后只有一 个精子诱导星光并形成雄原核，而卵子在受到精子激活后，继续完成 第二次减数分裂排出第二极体，形成雌原核，雌雄原核形成后融合成 合子核，随即进行卵裂。整个过程有着完整的受精细胞学程序，由此 产生的杂交后代兼具父母本双亲的遗传组成和性状特征。上述研究结 果证明了杂交后代的遗传来源于亲本的异源精子和卵子杂交受精，为 鱼类远缘杂交的受精细胞学及发育生物学提供了基础实验数据。 2．通过分子克隆和序列比对，分析了以团头鲂为母本、翘嘴红鲔 为父本产生的F1代二倍体鲂鲐、三倍体鲂鲔及其二倍体自交后的F2 代二倍体鲂鲐，以及反交产生的F1代二倍体鲐鲂及其自交后的F2代 二倍体鲴鲂这五种杂交后代鱼与双亲5SrDNA的分子结构和变异特 征。研究结果表明：团头鲂的基因组只含一种5SrDNA结构单元 (188bp)，翘嘴红鲔的基因组含两种5SrDNA结构单元(188bp、 I：188bp)，他们与翘嘴红鲔的286bp结构单元(简称classII：286bp) 拥有高度相似的编码区。这两种结构单元的5SrDNA含有不同的非 rDNA单元，含 166bp。杂交后代(F1和F2)均遗传了双亲全部5S rDNA rDNA结构单元。杂交后代与双亲的5S 188bp和286bp两种5S 基因区高度保守，而NTS序列则出现各自不同的变异，包括多个碱 基的替换以及序列的插入等。与双亲的NTS—I相比