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黄曲霉毒素检测试剂盒说明书适用
北京普天新桥技术有限公司 Beijing Potenov Technology CO.,Ltd 网址:
黄曲霉毒素检测试剂盒说明书
适用
Beacon 黄曲霉毒素检测试剂盒利用竞争酶联免疫吸附原理定量检测小麦,大麦,芽麦,燕麦,谷物中的黄曲霉毒素。
检测原理
Beacon 黄曲霉毒素检测试剂盒是基于竞争性酶联免疫吸附检测法(普天酶标仪检测黄曲霉毒素) 。用甲醇/水震荡萃取
粉碎样品中的黄曲霉毒素,过滤水相萃取物,然后进行免疫学检测。加黄曲霉毒素的酶标记物到已加有标准或样品的
测试孔中,抗体被加入后反应开始,样品及酶标记物竞争结合连接在微孔上的抗体,10 分钟培养后,倒掉孔中的溶
液,洗掉微孔中未的结合黄曲霉毒素和酶标记物。加入无色的底物溶液,培养10 分钟,所有结合的酶标记物使底物
转化成蓝色物质。加入停止液然后读取吸光度值,未知浓度样品与标准吸光度值进行比较,就可以得到样品的黄曲霉
毒素浓度。
特异性
Beacon 黄曲霉毒素检测试剂盒对于黄曲霉毒素有很强的特异性,标准品设定为黄曲霉毒素B1,以下表格展示了与其
他形式的交叉反应率。
复合物 50%BO 交叉反应率
黄曲霉毒素B2 39 25%
黄曲霉毒素G1 39.5 25%
黄曲霉毒素G2 221 4%
LOD (最低检测限) 1.0ppb
LOQ (最低定量限) 2.0ppb
试剂及材料
若试剂盒保存在2-8℃,未拆开包装的试剂盒在标识的保质期之前均可放心使用。
1. 真空包装,包含干燥剂的8 ×12 的微孔板。
2 . 5 瓶2ml 浓度为0 ,2.0,7.5, 25,100 ng/ml (ppb)的黄曲霉毒素标准品,(注意:因为谷物样品在萃取过程中1:
10 倍稀释,标准品实际上为设定标准浓度的1/10,所以原样品的浓度无需校正)。
3 . 1 瓶8ml 的酶标记物。
4 . 1 瓶8ml 的兔抗黄曲霉毒素抗体。
5 . 1 瓶14ml 的底物溶液
6 . 1 瓶14ml 的停止液(注意:1N 盐酸,小心操作!)
7 . 操作说明书
注意事项
1. 每种试剂最适用于 Beacon 黄曲霉毒素试剂盒。其他生产商的试剂不可替代本试剂盒中的任何试剂,不同批次
之间的试剂不可混用。
2 . 被稀释或污染的试剂及程序中未提及的样品种类都会导致结果失真。
3 . 不可使用过期试剂。
4 . 开始实验前试剂需回温于室温(20-28℃),但避免试剂在室温存放过久(>24 小时)。
5 . 黄曲霉毒素为极毒物质,将所有丢弃的液体倒入盛有家用漂白粉(不低于10%)的塑料容器中,所有的实验器具必
须在30%家用漂白粉溶液中浸泡至少1 小时,戴上手套穿上防护服以避免皮肤及黏膜与试剂或样品萃取物接触,如果
一旦接触,必须立即用大量水冲洗。
6 . 停止液为1N 盐酸,避免皮肤及黏膜接触,如果有溅出,立即清除并用大量水冲洗。
所需材料(不提供)
1. 实验室用蒸馏水或去离子水
2 . 色谱级甲醇
免费热线:400-668-5108 电话:01058407559 传真:010网址:
北京普天新桥技术有限公司 Beijing Potenov Technology CO.,Ltd 网址:
3 . 具塞锥瓶,大于100ml
4 . 用于萃取样品及收集萃取液玻璃器皿
5 . 滤纸,Whatman GF/A 及相当者
6 . 可吸取50ul 容量的移液器及一次性吸头
7 . 可吸取50ul 或100ul 的八道移液器及一次性吸头
8 . 吸水纸
9 . 450nm 的普天酶标仪(型号:PT-3502)
10. 计时器
提取液制备
1. 分别量取20ml 蒸馏水/去离子水至各锥形瓶
2. 分别量取80ml 甲醇至各锥形瓶,震摇使之充分混匀
样品的准备
1. 粉碎好的样品过20 目筛并在取样前充分混合,不立即分析的样品应放在冰箱中储存。
2 . 称取50g 样品和5.0gNaCl 至一有盖容器中。
3 . 加入100ml 甲醇/水提取液。
4 . 盖好盖子高速搅拌1 分钟。
5 . 静置2-3 分钟,使样品沉淀。
6 . 用Whatman GF/A 玻璃纤维滤纸过滤10ml 萃取液,收集滤液到一干净容器中。
7 . 取5ml 萃取液,加入20ml 水稀释。
8 . 过滤稀释液,待测。
检测程序(注意标准及样品做平行试验,可以提高检测的准确度及精确度)
1. 开始实验前要求试剂及样品萃取液达到室温
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