超声法提取大青叶中总黄酮的工艺及其抗氧化活性研究论文.doc

超声法提取大青叶中总黄酮的工艺及其抗氧化活性研究毕业论文 目 录 前 言 1 1.文献综述 3 1.1大青的概述 3 1.1.1大青的本草学记载 3 1.1.2大青的化学成分 5 1.1.3大青的药理活性 9 1.2黄酮类化合物的概述 12 1.2.1黄酮类化合物的性质 12 1.2.2黄酮类化合物的生物活性 14 1.2.3黄酮类化合物的提取方法 19 1.2.4黄酮类化合物国内外研究状况 23 2.大青叶中总黄酮的提取及含量测定 24 2.2 试剂及药品 24 2.3实验步骤 24 2.3.1准备工作及波长的确定 24 2.3.2标准品确定 25 2.3.4标准品的测量及绘制标准曲线 25 2.3.5供试样品的制备 26 2.3.6样品的测试 27 2.4大青总黄酮提取工艺条件优化过程 27 2.4.1单因素最佳值的确定 27 3.总酚含量的测定 33 3.1 实验仪器 33 3.2试剂及药品 33 3.3 Folin—Ciocalteu比色法测定总酚酸含量 33 3.3.1 Folin—Ciocalteu试剂的配制 33 3.3.2对照品溶液制备 33 3.3.3标准曲线的制备 34 3.3.4样品的测定 34 3.3.5测定单因素多酚含量 35 4.清除DPPH·自由基能力的测定 40 4.1.实验仪器、药品及试剂 41 4.1.1 实验仪器 41 4.1.2实验试剂及药品 41 4.2清除DPPH·能力的测定 41 4.2.1 DPPH·配制 41 4.2.2标准曲线的绘制 41 4.2.3样液的测定 43 4.3测定单因素抗氧化活性的影响。 43 5.清除ABTS·+自由基能力的测定 48 5.1实验仪器、药品及试剂 48 5.1.1 实验仪器 48 5.1.2实验试剂及药品 48 5.2清除ABTS·+测定 49 5.2.1 ABTS·+自由基的配制 49 5.2.2标准曲线的绘制 49 5.3样液的测定 51 5.4测定单因素对清除ABTS·+自由基能力的影响 51 6.单因素实验总结 56 致谢 59 参考文献 60 前 言 黄酮类化合物是一类存在于自然界的、具有2-苯基色原酮结构的化 合物。它们分子中有一个酮式羰基，第一位上的氧原子具碱性，能与强酸 成盐，其羟基衍生物多具黄色，故又称黄碱素或黄酮。 近年来， 针对黄酮类化合物的药理活性的研究有很多。由于黄酮类化合物分布广泛，所以它们具有多种药理活性。经研究表明，黄酮具有很好的心血管系统活性，不少治疗冠心病的中成药里均含有黄酮类化合物。黄酮除了具有心血管活性之外，还具有抗菌及抗病毒活性、抗菌及抗病毒活性、抗炎。此外，大量研究表明黄酮类化合物还具有降压、降血脂、抗衰老、提高机体免疫力、泻下、镇咳、祛痰、解痉及抗变态等药理活性。 用超声波有机溶剂法提取黄酮类物质，是近几年来新发展的方法，具有效率高、时间短、操作简便、节能等优点。超声提取技术的基本原理主要是利用超声波的空化作用加速植物有效成分的浸出提取。因此，超声波不仅大大缩短了提取时间，而且提高了有效成分的提出率以及原料的利用率。而且超声提取技术能避免高温高压对有效成分的破坏。 自由基与人的病理（心脏病、糖尿病、肿瘤、动脉粥样硬化、类风湿等）、生理（衰老）有密切关系。生物体内常见的自由基有超氧自由基、羟自由基、烷氧自由基。自由基性质活泼，有极强的氧化能力，对人体能造成极大危害，在体内自由基和脂质过氧化作用下能使大分子成分发生氧化变性、交联和断裂，导致细胞结构改变，从而引起癌症等退变性疾病，黄酮类化合物有很好的清除自由基和抗氧化能力，对防止疾病以及人的健康有积极意义。 黄酮化合物具有很好的清除自由基和抗氧化能力，能阻止自由基在体内的产生。其作用机理包括与超氧反应阻止自由基引发连锁反应；与金属离子鳌合阻断自由基的生成，与脂质过氧化基 ROO·反应阻断脂质过氧化过程。 用 DPPH·法、ABTS·+法测定了总黄酮提取物的清除自由基能力。通过试验证明，提取物具有较强的清除DPPH·自由基、清除ABTS·+自由基的能力，说明提取物含有能清除羟基自由基、烷基自由基或者过氧自由基的抗氧化物质。 本文以大青叶为研究对象，就其中总黄酮的提取工艺及其抗氧化活性进行了探讨。 1.文献综述 1.1大青的概述 大青（Clerodendrum cyrtophyllum Turcz）为马鞭草科（Verbenaceae）落叶灌木，又称为羊咪青、路边青根（根的中药名）、路边青叶（叶的中药名）、臭大青、淡婆婆（湖南）、山靛青（浙江）、路边青、大青木。大青高1~2m。根皮淡黄色。嫩枝有短柔毛，茎无毛。也对生，单叶；叶片椭圆形或长圆状披针形，长6~17cm，宽4~6.5cm，顶端渐尖