萃取分离法2.ppt

第四章 萃取分离法 溶剂萃取的基本参数 4 萃取效率与萃取次数的关系 5 分离因数β 练习 饮用水常含有痕量氯仿。实验指出，取100 mL水，用1.0mL戊烷萃取时的萃取率为53%。试问取10 mL水，用1.0 mL戊烷萃取时的萃取率为多大？ 物理萃取 化学萃取 乳化现象及去乳化 乳化： 水或有机溶剂以微小液滴形式分散于有机相或水相中的现象。常常发生在实际发酵产物的萃取操作中。产生乳化后使有机相和水相分层困难。 乳化产生原因 1）油水混合过于激烈，导致分相困难；2）萃取剂负载处于饱和或过饱和状态（主要因素）；3）萃取体系选择有问题；4）萃取过程中出现粉体沉淀；5）相比过大或过小； 乳化处理及破乳 1)在操作前，对发酵液进行过滤或絮凝沉淀处理，可除去大部分蛋白质及固体微粒，防止乳化现象的发生。 2)乳化产生后，采取适当的破乳手段。 如果乳化现象不严重，可采用过滤或离心沉降的方法。 对于O/W型乳浊液，加入亲油性表面活性剂，可使乳浊液从O/W型转变成W/O型，但由于溶液条件不允许W/O型乳浊液的形成，即乳浊液不能存在，从而达到破坏的目的。 相反，对于W/O型乳浊液，加入亲水性表面活性剂，如SDS可达到破乳的目的。 新型萃取技术 超临界流体萃取 双水相萃取 微波萃取 反胶束萃取 。 。 超临界流体萃取 超临界流体萃取的基本流程 SFE的基础研究与应用在近30年内取得了很大的进展。此新兴技术的研究涉及了众多领域，SFE是一种 “绿色工艺”，符合当今世界可持续发展的观念，为正兴起的“绿色化学”提供了一种新的思路。因此，无论是科学研究还是实际应用，SFE的前途是诱人的，必将得到更大的发展。 双水相萃取现象 1896年 Bei jerinck 明胶＋琼脂 明胶＋可溶性淀粉 双水相的形成 双水相的形成原理 聚合物的不相溶性： 聚合物分子的空间阻碍作用，相互间无法渗透，当聚合物浓度达到一定值，就不能形成单一的水相，故具有强烈的相分离倾向。 某些聚合物溶液与无机盐溶液相混合，浓度一定，也会形成两相（聚合物-盐双水相体系）。 在两水相中，水分占很大的比例，生物大分子（蛋白质、细胞器等）不会引起失活，但可以不同的比例分配于两相中。 双水相萃取技术定义 利用双水相的成相现象及待分离组分在两相间分配系数的差异，进行组分分离及提纯的技术。 特点 两相均含有大量的水（高达80%以上）， 界面张力小，一般只有0.5-10-4mN/m， 萃取环境和条件温和 生物相容性好，有时有稳定作用； 分配系数可控：聚合物修饰、相系统组 成、操作条件容易放大，几百倍。 双水相的形成 两种聚合物溶液相互混合，分层或混合成一相取决于： 体系熵的增加； 分子间作用力。 大分子间的混合，如以摩尔为单位，则分子间作用力占主导地位而决定混合结果。 聚合物的不相溶性：两种聚合物分子间如有斥力存在（即某种分子希望在它周围的分子系同种分子而非异种分子)，达到平衡后，就有可能分成两相，两种聚合物分别进入到一相。 常用双水相体系 利用生物物质在两相中的不同分配可实现其分离。生化工程中常用的双水相体系有： 聚乙二醇（PEG）/葡聚糖（Dex）： 聚乙二醇（PEG）/无机盐（硫酸盐或磷酸盐）。 特点： 无毒性； 能使生物高分子稳定（多元醇或多糖结构）。 二、物质在两相中的分配 物质在两水相中的分配用分配系数K表示： K=C1/C2 式中： C1、C2—分别代表上下相中溶质的浓度 K—与温度、压力以及溶质和溶剂的性质有关，相系统固定时，K为一常数，与溶质的浓度无关。 影响分配平衡的参数 成相聚合物的相对分子质量： 聚合物相对分子质量降低，蛋白质易分配于富含该聚合物的相。 在PEG/Dex系统中，PEG分子量下降，分配系数增大，Dex分子量减小，分配系数降低。 成相聚合物的浓度： 接近临界点，蛋白质均匀分配于两相，K接近1； 成相聚合物总浓度增加，系统远离临界点，两相性质差别增大，蛋白质趋向一侧分配，K或大于1，或减小低于1。 盐类的影响： 在两相间形成电位差，对带电生物大分子产生很大影响。 pH值： 影响蛋白质中可解离基团的离解度，改变蛋白质所带电荷和K。 温度： 影响相图，影响分配系数。 主要用于胞内酶的提取、精制； 用双水相萃取技术处理细胞匀浆液： 可方便除去细胞碎片，使酶得到精制。 蛋白质在多数情况下收率能达90%；K=2~20，一般大于3，很多杂蛋白质能同时除去。 双水相萃取运用条件 运用双水相萃取胞内酶应满足下列条件： 欲提取的酶和细胞分配在不同的相中（如细胞碎片分配在下相—盐，蛋白质分配在上相—PEG）； 酶的分配系数应足够大，经一次萃取，就能得到高收率