薄层色谱分离定性.pptVIP

组员： 薄层色谱分离定性 简述 薄层层析又叫薄层色谱，是色谱法中的一种，是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术，属固—液吸附色谱，它兼备了柱色谱和纸色谱的优点，一方面适用于少量样品（几到几微克，甚至0.01微克）的分离；另一方面在制作薄层板时，把吸附层加厚加大，因此，又可用来精制样品，此法特别适用于挥发性较小或较高温度易发生变化而不能用气相色谱分析的质。此外，薄层色谱法还可用来跟踪有机反应及进行柱色谱之前的一种“预试”。 分离 （二）方法原理 　　原理： 薄层色谱分离法是将固定相吸附剂均匀地涂在玻璃上制成薄层板，试样中的各组分在固定相和作为展开剂的流动相之间不断地发生溶解、吸附、再溶解、再吸附的分配过程。不同物质上升的距离不一样而形成相互分开的斑点从而达到分离 流动相（ 展开剂）的选择 《1》薄层层析所用的展开剂主要是低沸点的有机溶剂 《2》对于容易分离的化合物，用单一溶剂展开 《3》优点：溶剂简单，分离重现性好。 对于难分离组分，则选用二元、三元、甚至多元溶剂 Rf太小——加入强极性展开剂 Rf过大——降低展开剂的极性  固定相（吸附剂）的选择 纤维素、淀粉 硅酸镁 硫酸钙 硅胶 佛罗里硅土 对极性有机物的吸附作用增强 氧化镁 氧化铝 活性炭 吸附剂 吸附是表面的一个重要性质。任何两个相都可以形成表面，吸附就是其中一个相的物质或溶解于其中的溶质在此表面上的密集现象。在固体与气体之间、固体与液体之间、吸附液体与气体之间的表面上，都可能发生吸附现象。 常用的吸附剂----氧化铝 ----硅胶，其他 吸附剂（硅胶G，氧化铝G)与蒸馏水的比例是1：2到1:2.5 被分离试样组分极性、吸附剂活性和展开剂极性之间的关系 详见P197 活泼 吸附剂 （固定相） 展开剂 （流动相） 极性 不活泼 被分离物质 B B’ A C C’ 非极性 非极性 极性 A’ Ⅴ Ⅰ 图2 点样示意图 2 点样 样品溶液的配制 点样 原料样 反应混合液样 点样直径≤2mm 1cm≤点间距≤1.5cm 1-2cm 上升法 倾斜上行法 下降法 图4 展开方式示意图 画溶剂前沿线 观察斑点 记录Rf值 图5 薄层色谱展开示意图 1h反应混合液样 原料样 2h反应混合液样 结论：反应结束 三 薄层色谱操作 1 薄层板的制备 吸附剂硅胶 调制 玻璃板 涂布 注意事项： 调制时慢慢搅拌，勿使产生气泡。 均匀涂布在玻璃板上，摇动摊平，晾干。 使用前放入烘箱内，在105-115℃左右烘干40-50min。冷 却后使用。 粘合剂、添加剂 1-2cm 图 3 展开示意图 3 展开 展开剂要接触到吸附剂下沿，但切勿接触到样点。 盖上盖子，展开。 观察展开情况。 取出薄层板 如果化合物本身有颜色，就可直接观察它的斑点。如果本身无色，可先在紫外灯光下观察有无荧光斑点（有苯环的物质都有），用铅笔在薄层板上划出斑点的位置；对于在紫外灯光下不显色的，可放在含少量碘蒸气的容器中显色来检查色点（因为许多化合物都能和碘成黄棕色斑点），显色后，立即用铅笔标出斑点的位置 4 显色 比移值Rf 溶剂前沿 起始线 A B a b c A B Rf值相差越大，分离越好。一般要求分离后组分的Rf值在0.2～0.8之间，各组分的Rf值之差应大于0.05，以防斑点重叠。 谢谢