黄尾密鲴及翘嘴红鲌杂交F1的主要生物学特征研究.pdf

分类号 密级 学校代码 10542 学 号 201102141278 黄尾密鲴与翘嘴红鲔杂交Fl的主要生物学 特征研究 Studiesonthemain biological oftheF ofBleeker’S tail 1 hybrids yellow davidi (Xenocypris is Culter(ErythroculterilishaeformBleeker， 毋) 指导教师姓名、职称 到尘至熬援 学 研 湖南师范大学学位评定委员会办公室 二零一四年四月 |JIIIII IIIIJIIIIIIIII PIIIIIIII Y2548329 摘要 鱼类远缘杂交是指亲缘关系在种或种以上的两种鱼类之间的杂 交，其能有效的整合双亲的优点，可能使杂交后代在外形、生长速 度、存活率以及抗病能力等方面表现出杂种优势，因此远缘杂交是 一种重要的鱼类遗传育种和性状改良方法。另外，远缘杂交也已被 证明是形成多倍体的一种重要方式。本研究在通过将雌性黄尾密鲴 得鲴鲐杂交F1代的基础上，对杂交后代的DNA含量、染色体数目、 外形特征、5SrDNA的结构组成与变异及染色体定位、Sox基因等 生物学特征进行了系统研究，主要研究内容如下： 1)通过雌性黄尾密鲴与雄性翘嘴红鲐远缘杂交获得了鲴鲐杂交 F。代。利用流式细胞仪测定法和外周血细胞培养的染色体倍性检测 方法对鲴鲍F】的倍性进行检测，结果表明鲴鲔F】为二倍体(2n=48)。 对两年龄的二倍体鲴鲐的可数性状进行了系统分析，结果表明其部 分性状偏向于父本或者母本，也有居于父母本之间的，体现出杂交 特性，还有较父母本高的。性腺石蜡切片表明雌性二倍体鲴鲔具有 正常发育的卵巢。 2)对二倍体鲴鲐及其亲本的5SrDNA进行了克隆及测序分析 和染色体定位。发现在黄尾密鲴中含有两种大小分别为188bp和 rDNA结构单元，分别命名为结构单元I和结构单元II； 221bp的5S 遗传获得结构单元I和结构单元III外，还衍生出结构单元Ⅳ (212bp)，但并未观察到结构单元II。5SrDNA一188bp探针荧光原 位杂交实验发现，在鲴鱼自及其亲本染色体中期分裂相中明显可见四 个信号，两个位于一对最大的亚中部着丝粒染色体上，另一对位于 一对亚端部着丝粒染色体上。这些结果表明鲴鲔杂交后代在遗传了 亲本大部分5SrDNA结构单元的同时，也发生了5SrDNA结构单元 变异。 3)参照Sox基因保守的HMG框序列，设计合成一对简并引物 对杂交后代及其亲本的全基因组DNA进行了PCR扩增和测序分析， 并将二倍体鲴鲔与其亲本Sox基因进行了比较分析。发现黄尾密鲴 红鱼白中有三个Sox片段，Soxl(215bp)，Soxl Sox9(710bp)禾D 5S 关键词：远缘杂交；杂交鱼； rDNA；荧光原位杂交；Sox基因 ABSTRACT different Distant offishesisthedistant oftwo hybridization