多糖酸水解预处理方法研究进展.pdfVIP

第38卷第3期 广州化学 、b1．38No．3 2013年9月 Gu孤g出0uCheInis缸y S印t．2013 文章编号：1009-220x(2013)03．0085．04 多糖酸水解预处理方法的研究进展 李娜1， 宗同强1， 陈彩娥2， 曾钦繁2， 张儒2 (中国科学院广州化学研究所分析测试中心，广东广州510650； 2．茂名市生产力促进中心，广东茂名525000) 摘要：多糖是构成生命的基本物质之一，单糖组成的测定是多糖质控的主要指标。 近年来对多糖酸水解的预处理方法的研究受到人们的重视。目前多糖酸水解的预处 理方法有直接酸水解、微波预处理、超声波预处理和离子液预处理等，多糖酸水解 研究和开发具有广阔的前景。 关键词：预处理；多糖；酸水解 中图分类号：0629．12文献标识码：A 多糖广泛存在于动物细胞膜、植物和微生物细胞壁中，是构成生命的基本物质之一。在 生命过程中，多糖不仅作为能量物质和结构物质，而且还具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤、抗衰 老、免疫调节、降血脂及抗血栓等多种生物活性[1】。 在多糖研究和开发中，多糖的结构分析对于揭示多糖构效关系、开发新型功能多糖具有 重要意义。多糖结构比蛋白质或核酸大分子的结构复杂得多，直接对结构进行研究比较困难， 但是多糖的结构分析对于明确多糖的生物学功能是很有必要的。如何控制多糖的质量标准是 药物研发中急需发展的技术，其中单糖组成的测定是多糖质控的主要指标。由于糖链结构的 复杂性和多样性，导致了各种苷键的酸催化水解的不同敏感性【2]，因而要获得用于结构分析 的准确结构的单糖组分或寡糖片段，选择其酸水解的条件是十分必要和需要认真研究的。 酸水解是进行单糖组成分析的首要步骤，同时也是最为关键的一步[3】。目前酸水解的预 处理方法主要有四大类：直接酸水解，微波预处理，超声波预处理，离子液预处理。 l直接酸水解 1．1盐酸水解法 盐酸、硫酸和三氟乙酸是水解多糖常用的酸。 盐酸是水解植物多糖最常用的酸，一般是用浓盐酸在较高的温度下水解，降解得到低聚 合度的寡糖。由于盐酸在密闭环境中的高压高温条件下有氧化性和强酸性，造成对多糖的破 坏。水解速度随着温度升高和盐酸浓度的增大而加快，工艺简单易行，但是不易控制，并且 耗时长，不实用，并且四糖以上的寡糖含量很低【4】。 收稿日期：2013．05—20 作者简介：李娜(198“)，女，硕士；研究方向：天然产物结构的分析及应用。 万方数据 广州化学 第38卷 1．2硫酸水解法 硫酸适合中性多糖的水解，硫酸水解法须严格控制硫酸的浓度，浓度过高易引起多糖炭 化，同时色谱图中有较多的杂质峰；但硫酸浓度过低又会导致多糖水解不完全，分析结果产 生较大偏差。并且硫酸法水解后，要用氢氧化钡除去硫酸，水解产生的单糖会被硫酸钡沉淀 吸附而遭受损失，同时单糖也可能与硫酸作用发生降解而降低产率，会破坏一部分多糖使检 测结果的准确度降低【5J。 1．3三氟乙酸水解法 三氟乙酸是在多糖水解尤其是结构分析中应用最为广泛的一种酸。三氟乙酸氧化性不 强，对多糖的破坏小，而且带有强电负性的．CF3基团，吸引更多氢离子，催化促进多糖的水 解。三氟乙酸比无机酸好，因为有机酸有足够的挥发性，水解后可用冷冻干燥法或减压蒸馏 除去，避免了传统的中和步骤和硫酸水解炭化的问题。但其毒性大，也具有一定的局限性。 三氟乙酸主要用于水解植物细胞壁多糖、糖胺聚糖和糖蛋白，广泛应用于多糖组分分析 中即]。 2微波辐射预处理 微波主要是对物质的电性和磁性产生作用，有极化作用、导电作用和磁化作用。微波辐 射是对表面和内部同时进行的一种体系加热，体系受热均匀，升温迅速，而且热量能直接深 入多糖内部，较常规加热具有缩短水解时间、加快水解速度、提高还原糖的含量等优点[8】。 目前有微波辐射预处理和微波辅助离子液预处理方式。 2．1微波辐射预处理 纤维素的酸