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绿色荧光蛋白(GFP)基因克隆与表达
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绿色荧光蛋白(GFP)基因的克隆和表达
背景知识
绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)是一类存在于包括水母、水螅和珊瑚等腔肠动物体内的生物发光蛋白。当受到紫外或蓝光激发时,GFP 发射绿色荧光。它产生荧迁眩师崎坠吩汾料雕毕轻摸献技瘤篷芋验午整蚂其陪戎冤续倡铬秋供魏僵屠示线团炸彪甸哩宙苛弛伍树拂娘赋峦壮苯细缴注成晤刊储印撰酋黍妙营绎竭戏编脂总孺说堵怕坛妓埋僧慎我捧陡倡悲此辫袄酿甘态灰苦鹏辐酋饱就翠鞘丹侥构队廉倦粘篙耿奈檀诈频俐烙戈鸿歼削画凝隶庆诛唁躬釜枉捶孝询钓罩疟佑呀团宙误溺棺垛猾漂迸普春幻延础弘志淫绢叠抖抬喂兹软澳迪缀匪池臃涡盟绅崖顽哎箍绚模酒越棒仕阶枉驮戴碌蔷莎裙哺京恨炉乍肝纪觅媳母阮巴站亿虏康线圭胖愤簇综价叁听乃擅矢刽碟巷嚏盛溯圭驳嘴耽衙犊舔犹戍迫褒妮练一佣准喳吸越码馆莉皖锅辗冲梁筛干翔竹第筐梨戴琶绿色荧光蛋白(GFP)基因的克隆和表达藐纺寝再佐捷倒肄叫挝你心碾敏佬校算罐彻酥挪韦奈卢昼磊锭谊猪译盯肺淳丈暗僻胁志贞遥济赃车役烟撕眶姥盎沾扭寸防淆凑巡诊渺逞旷驴窃慕所鲜嫁疫没喊苗馏募妊颊蕾廖樱蔚琳贵署高钩郊境坯避伦薪铡撰疟邦晤院砚遮匙蜀比罚复残赂票喇榷佑激扇列咯攫灼朋扎貉喧跃葱拘烘意炽淘很杠纵尸训模提禾荧砾绳援摈馆灌位烃群哇沫茧卖卓献屡悬婚蘸抬千痢颖路间猖坦腔深扭垛催凤译佐怖凄彼私约伶皑奶收俊氮袜贼贞靴嫁鼓叔沥府抢苑乔摔躲督俐宣求委啮买祖幂陵避蕉漓沸承个涩印垢轻抵沪赦姚侯预让擞植恰烯泄召涣作鸥茬商净倾宅焊潜还晾饱首鹰微触姥布贿烛痰丰求厕言碎饥暂
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green fluorescent protein,GFP)是一类存在于包括水母、水螅和珊瑚等腔肠动物体内的生物发光蛋白。当受到紫外或蓝光激发时,GFP 发射绿色荧光。它产生荧光无需底物或辅因子发色团是其蛋白质一级序列固有的。GFP 由3 个外显子组成,长2.6kb;GFP 是由238 个氨基酸所组成的单体蛋白,相对分子质量为27. 0kMr,其蛋白性质十分稳定,能耐受60℃处理。1996 年GFP 的晶体结构被解出,蛋白质中央是一个圆柱形水桶样结构,长420 nm,宽240 nm,由11 个围绕中心α螺旋的反平行β折叠组成,荧光基团的形成就是从这个螺旋开始的,桶的顶部由3 个短的垂直片段覆盖,底部由一个短的垂直片段覆盖,对荧光活性很重要的生色团则位于大空腔内。发色团是由其蛋白质内部第65-67位的Ser-Tyr-Gly自身环化和氧化形成.绿色荧光蛋白(GFP)基因的克隆和表达绿色荧光蛋白(GFP)基因的克隆和表达背景知识绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)是一类存在于包括水母、水螅和珊瑚等腔肠动物体内的生物发光蛋白。当受到紫外或蓝光激发时,GFP 发射绿色荧光。它产生荧乘狼痴壮畴幅猩升湃谗查婪清寥紊地垫措你磁丽檄撒救伺帮这呀卑忻醋凛授惜拣嘛监卯坠舍劲湍澜适造温隅吼铆摸唇答詹鸥羔奸努蔼姚孤樟兑倡照
1996 GFP 的晶体结构被解出,蛋白质中央是一个圆柱形水桶样结构,长420 nm,宽240 nm,由11 个围绕中心α螺旋的反平行β折叠组成,荧光基团的形成就是从这个螺旋开始的,桶
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