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第3章 灭菌技术 ; 因此，多数培养过程需要进行纯种培养，具体措施为： 1) 使用的培养基和设备须经灭菌； 2) 好气培养过程中使用的空气应经除菌处理； 3) 设备应严密，生物反应器中要维持高于环境的压力； 4) 培养过程中加入的物料应经过灭菌； 5) 使用无污染的纯粹种子等。;3.1 灭菌的方法;灭菌方法;过氧乙酸;稳态二氧化氯;浸泡或喷洒;3.2 培养基的灭菌操作及其设备;3.2.1 分批灭菌 ;图2-1 实罐灭菌设备示意图 ;二、操作;3.2.2 连续灭菌 ;二、连续灭菌的流程 ;;三、连续灭菌的设备 ;2、 喷射加热器 ;3、维持罐 ;3.2.3 发酵设备的灭菌 ;3.3 空气除菌流程及设备;空气(即大气)是气态物质的混合体，包括氧气、氮气、氢气、二氧化碳、惰性气体、水分等，还含有悬浮于空气中的灰尘及各种微生物。Air中微生物主要是细菌、细菌芽孢、霉菌孢子、霉菌、酵母和病毒粒子。而???微生物很少单独存在，一般附着在air中尘埃上。菌含量Y与尘埃个数X有以下关系：;另外，大气中灰尘和微生物的含量随地域和季节而变化，一般为103~104个/m3 ，其分布规律为： ;如酵母培养过程，因它的培养基是以糖源为主，有机氮比较少，它能利用无机氮源、要求的pH值较低，在这样低pH值下，一般细菌较难繁殖，而酵母的繁殖速度又较快，在繁殖过程中能抵抗少量的杂菌影响，因而对无菌空气的要求不如氨基酸、液体曲、抗生素发酵那么严格。而氨基酸与抗生素发酵因周期长短的不同，对无菌空气的要求也不同。总的来说，影响因素是比较复杂，需要根据具体的工艺要求。一般按染菌机率为10-3来计算，即1000次发酵周期所用的无菌空气只允许1、2次染菌。 ;3.3.2 过滤除菌流程 ;;大型空气压缩机;二、空气除菌流程; 1、空气冷却流程 ;究竟气温和相对湿度低到什么程度才能采用该流程，需要通过计算来确定。; 2、两级冷却、加热除菌流程 ;3、高效前置过滤除菌流程 ;3.3.3 过滤介质 ;1、棉花 ;2、玻璃纤维 ;3、活性炭 ;4、超细玻璃纤维纸 ;5、石棉滤板 ;6、烧结材料过滤介质 ;7、新型过滤介质 ;上面介绍的各种过滤介质的除菌效果顺序为：;3.3.4 空气过滤除菌的机理;深层过滤介质层是由无数纤维层交错组成的，形成一定大小的网格孔隙。当颗粒随气流通过滤层时，网格阻碍气流直线前进，使气流出现无数次改变运动速度和运动方向，绕过纤维而前进，这些改变引起颗粒对滤层纤维产生惯性冲击、阻拦、布朗扩散、重力沉降、静电吸引等作用而将颗粒滞留在纤维表面。;图2-9 单纤维空气流动模型 ——空气流线；--- 颗粒流线 df 纤维直径；dp 颗粒直径 b 气流宽度 ;2、 拦截滞留作用;返回;3、布朗扩散作用;4、重力沉降作用;5、静电吸引作用;一、深层棉花过滤器 ;3、过滤介质;过滤层厚度的计算;2.550;二、平板式纤维纸分过滤器 ;2、工作原理;三、管式过滤器 ;四、接迭式低速过滤器 ;;一、粗过滤器 ;1、布袋过滤器;2、油浴洗涤装置 ;3、水雾除尘装置 ;二、空气贮罐 ;三、气液分离器 ;1、旋风分离器 ;2、 填料式分离器;三、空气冷却器 ;一、总过滤器的灭菌 ;二、分过滤器的灭菌 ;灭菌方法有哪几种？ 何谓空消和实消？各自操作如何？ 连续灭菌流程有哪几种？各自特点是什么？ 空气过滤除菌流程一般包括哪几部分？各自作用是什么？ 某生物制药厂采用空气冷却流程以制备无菌空气。当地空气相对湿度60 %。空气进入总过滤器时的状态为：相对湿度60 %、压力0.4 MPa、温度350C。通过计算确定，当地气温最高不能高于多少？(10、12、15、20、350C的饱和水蒸气压力分别为1228、1418、1705、2339、5615Pa) 深层过滤除菌的机理是什么？请简述其各作用机制。 空气过滤除菌的设备主要有哪些？各自作用是什么？