温郁金翻译.docxVIP

苯酚硫酸法定量检测传统中药温郁金的多糖含量摘要：温郁金一直被当做一种中药而广泛使用。这篇文章叙述的是使用苯酚硫酸法定量检测其多糖的含量。检测涉及3种因素：5%的苯酚、硫酸、水浴温度，我们采用L9（33）的正交排列设计来获得最优比色方法。将3.0 mL的多糖溶液、1.0 mL 5%苯酚和7.0 mL硫酸于玻璃容器中混匀，然后放在40℃的水浴锅中；然后冷却至室温，保持20分钟；最后使用UV-2501分光光度计在485nm下检测吸收值。温郁金各种多糖含量分别为3.21%、3.23%、3.20%、3.18%、3.22%和2.38%。用这种方法得出的结果是充分的、有依据的和适用的，可能也适用于细菌多糖的检测。关键字：定量检测，苯酚硫酸法，正交排列设计，多糖，温郁金1.介绍Curcuma wenyujinY.H.Chen et C.Ling(中文名称“温郁金”)在中国是一种传统的中草药，据中国医药典籍记载，温郁金的根是具体被用作草药的部分，具有广泛的药用价值。温郁金于公元前627-649第一次在《药性论》被记载，其中描述温郁金的功能是活血祛瘀和减轻疼痛。现在温郁金已经用来治疗肝炎、月经紊乱和癫痫，这种草药在许多中国家庭中也可以用做健康食品来烹饪。 在最近几年，植物多糖被认为是一类重要的生物应答分子。据文献记载，酚色素，香精油和多糖是温郁金的主要成分。从温郁金获得的部分多糖有抗肿瘤作用和抗氧化活性。在这篇文章中，我们用超声波法来提取温郁金多糖。用苯酚硫酸法进行多糖检测，同时，使用D-葡萄糖作标准曲线。在众多多糖检测法中，苯酚硫酸法是最简单并且最可靠的方法。苯酚硫酸法应用广泛的原因得益于这种方法的简单可靠。其他方法中的蒽酮法，苔黑酚法和间苯二酚同样准确但是不常用。因为影响比色效果潜在因素有很多，而最优的实验条件是至关重要的一步。涉及到3个因素：5%的苯酚、硫酸、水浴温度，我们采用L9（33）的正交排列设计来获得最优比色方法。将3.0 mL的多糖溶液、1.0 mL 5%苯酚和7.0 mL硫酸于玻璃容器中混匀，然后放在40℃的水浴锅中；然后冷却至室温，保持20分钟；最后使用UV-2501分光光度计在485nm下检测吸收值。2.实验2.1.仪器和试剂KQ205B型超声波仪（昆山超声波仪制造有限公司，中国）和UV-2501 型分光光度计（岛津，日本）。所有的化学药品和试剂都是分析纯并都从天津化学试卷公司（天津，中国）处购买。样品和溶液都使用蒸馏水和去离子水。2.2.材料温郁金的根部从中国不同地方（表 1）取得并且标本由浙江农业大学天然产物研究中心保存，娄卢焕教授为证明人。所有的样本均为自然干燥，由高速旋转切割机磨碎并用60目的网筛筛选细小颗粒。最后，粉末样品储存在封闭的轻型容器中以便日后分析。2.3温郁金粗糖的提取精确称量样品（2.000g）于含80%乙醇的索氏提取器作预处理，去除色素、失活的酶及变性蛋白。剩下物质放置在曲颈瓶并添加30.0mL蒸馏水。然后用KQ205B型超声波仪在60℃下处理30分钟。在提取液中加入95%乙醇，在4℃冰箱下过夜沉淀多糖。离心收集沉淀，然后用1:1的二乙醚、丙酮洗涤2次，最后获得温郁金粗糖。多糖检测使用苯酚硫酸法，D-葡萄糖作标准曲线。2.4比色法的正交排列设计由于许多潜在因素影响比色，而最优的实验条件是至关重要的步骤。实际上，苯酚体积、硫酸体积和水浴温度被认为是实验最重要的因素。最优的比色方法应该一步一步的设计或者使用实验软件设计。在目前的研究中，所有影响因子都使用正交L9（33）实验方法检验。各种被选因素及其水平如表所示（表 2）。2.5.数据分析所获得的数据都通过ANOVA方法（SPSS version 13.0）进行数据处理。3.结果和讨论3.1.最大吸收峰的检出最大吸收峰的检出通过（Habibi，Mahrouz,Vignon,2005）并有微小改变。将3.0mL的标准葡萄糖溶液，1.0mL，5%苯酚和7.0mL硫酸在玻璃容器中混匀，然后放在40℃的水浴锅中；然后冷却至室温，保持20分钟；最后使用UV-2501分光光度计在300-600nm下检测吸收值，用3.0mL蒸馏水作空白。从得到的吸收值和波长光谱分析，我们能确定最大吸收值在458nm处获得。并且，我们选择485nm作为最优波长来提高方法的精确性。3.2.绘制葡萄糖的标准曲线配置20,40,60,80,100μg/mL的葡萄糖浓缩液，分别取3.0mL的标准溶液于玻璃容器中，然后加入1.0mL，5%苯酚和7.0mL硫酸，混合后放在40℃水浴锅中。然后冷却至室温，保持20分钟；最后使用UV-2501分光光度计在485nm下检测吸收值，用3.0mL的试剂空白作为空白对照。做出标准曲线。得到方程式：A=0.0072C+0.0255；R2=0.9988。结果是