面制品及海蜇中铝测定的分光光度法标准操作规程.docVIP

6 面制品及海蜇中铝测定的分光光度法标准操作规程 6.1 适用范围 本规程规定了面制品及海蜇等食品中铝含量的分光光度测定方法。 本规程适用于面制品及海蜇等食品中铝的含量测定。 本规程的检出限（LOD）为0.07μg，定量限（LOQ）为0.2μg。 6.2 原理 在pH6.7～6.0范围内，铝在聚乙二醇辛基苯醚(OP)和溴代十六烷基吡啶(CPB)的存在下与铬天青S反应生成蓝色的四元混合胶束，比色定量。 6.3试剂 使用优级纯的试剂，水为GB/T 6682的一级水。 6.3.1铬天青S溶液(1g/L)：称取0.1g铬天青S(C23H13SC12Na3)溶于100mL乙醇溶液(1+1)中，混匀。 6.3.2聚乙二醇辛基苯醚（OP）溶液(3+100)：吸取3.0mL 0P溶液溶于100mL水中。 6.3.3溴代十六烷基吡啶（CPB）溶液(3g/L)：称取0.6gCPB(C21H 36BrN)溶于30mL无水乙醇中，加水稀释至200mL。 6.3.4乙二胺-盐酸缓冲液(pH6.7～6.O)：量取无水乙二胺(C2H8N2)100mL，沿玻棒缓慢加入200 mL水中，冷却后缓缓加入190mL盐酸(6.3.13)，搅匀，用酸度计调节pH值为6.7～6.0，若pH7，则慢慢滴加HCl，若pH6.7，可补加乙二胺溶液(1+2)。 6.3.5氨水溶液(1+6)：量取10mL氨水，加去离子水并稀释至60mL。 6.3.6 0.mol/L 5硝酸溶液：量取45mL硝酸，加去离子水并稀释至1000mL。 6.3.7 铝标准贮备液：1000mg/L，由国家标准物质研究中心提供。 6.3.8铝标准使用液：精密吸取1.00 mL铝标准贮备少，置于100 mL容量瓶中，用水稀释至刻度，再从中准确吸取5.00 mL于50 mL容量瓶中，用水稀释至刻度，该溶液每毫升相当于1μg铝。 6.3.9对硝基酚乙醇溶液(1.0g/L)，称取0.1g对硝基酚溶于100mL无水乙醇中。 6.3.10抗坏血酸溶液(10g/L)：称取1.0g抗坏血酸，用水溶解并定容至100 mL，临用现配。 6.3.11 硫酸。 6.3.12 硝酸。 6.3.13 盐酸。 6.4 仪器与耗材 6.4.1 可调式控温电热消解炉，50mL带刻度硬质玻璃消解管。 6.4.2 分光光度计 6.5 操作步骤 6.5.1样品预处理 面制品样品在85℃干燥4h后粉碎均匀、称样；海蜇样品如果是即食样品用滤纸吸干表面水珠称样；如果海蜇是需再加工食用的，应按食用习惯将海蜇表面洗净用蒸馏水浸泡，每24h换2次水，浸泡48h，吸干表面水分后称样。 6.5.2 准确称取0.5～3g（精确至0.1mg）样品，置于50mL带刻度硬质琉璃消化管内，加入10mL硝酸（6.3.12）、0.5mL硫酸（6.3.13），在可调式控温电热消解炉（6.5.1）上加热（参考条件：120℃/0.5h，稍放置后升至180℃2～4h，再升至220℃），若变棕黑色，再加硝酸（6.3.12），直至冒白烟，消化液呈无色透明或略带黄色，冷却，加水10mL，加热至冒白烟，取出冷却，直接用水定容至50mL刻度，同时做试剂空白试验。 6.5.3测定 吸取使用铝标准液（6.3.8）0，0.25，0.50，1.00，2.00，3.00mL分别相当于0，0.250，0.50，1.00，2.00，3.00μg铝置于25mL比色管中，依次向各管中加入1％H2SO4 1mL，加入水至10mL，各吸取1.0mL样品消化液和试剂空白液分别置于25mL比色管中，加水至10mL。，向各管中滴加1滴对硝基酚乙醇液（6.3.9），混匀后滴加氨水溶液（6.3.5）至浅黄色，加硝酸溶液（6.3.6）至黄色消失，再多加1滴。向标准管、试样管、试剂空白管中加入抗坏血酸溶液（6.3.10）1 mL，混匀，加入铬天青S溶液（6.3.1）1.5 mL，混匀，加入OP溶液（6.3.2）0.5 mL，CPB溶液（6.3.3）1.0mL，乙二胺-盐酸缓冲液（6.3.4）1.5 mL，用水稀释至刻度，混匀，放置40min。用1cm比色杯于620nm波长测其吸光度，以零管调零点。绘制标准曲线，试样吸光值与曲线比较求得含量。 6.6 计算 试样测定结果按公式(1)计算。 …………………………（1） 式中： X----试样中铝的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）； A1----测定用试样液中铝的质量，单位为微克（μg）； A0----试剂空白液中铝的质量，单位为微克（μg）； V1----试样消化液总体积，单位为毫升（mL）； V2----测定用试样消化液体积，单位为毫升（mL）； m----试样品质量