第06章-高效液相色谱手性流动相添加剂法分离药物对映体.pdf

文献综述 高效液相色谱手性流动相添加剂法分离药物对映体 曾 苏 浙（江医科大学药物分析教研室 杭州 310031） 1 前言 式中，G：中性手性分子；KG：包含物稳定常数：kG和 生物体内的手性环境如酶、受体、抗体等与药物 对映体的生物活性密切相关，使用消旋体药物可能 导致错误的药动学行为和作用模式 1场〔。例如震惊世 界的沙立度胺致畸事件就是忽视立体化学效应的灾 kG·D：游离客体分子和它的CD包含物容量因子； 难。因此，在研制含不对称因素新药以及其产品质量 CD：环糊精；m：流动相；s：固定相。 控制过程中，拆分并测定药物对映体具有重要意义。 表观 换算 后得 ： 对映体的拆分和测定在分离科学上曾被认为是 可见，CD浓度、对映体与CD包含物的稳定常 最困难的工作之一。经典的方法，如分级结晶、旋光 法等的重现性或灵敏度欠佳。随着手性色谱学，尤其 数和容量因子与方法的立体选择性有关。 是手性高效液相色谱 HPLC）的发展，为解决上述 问题提供了有效的手段。HPLC分离药物对映体的 CD包含物在溶液中平衡相对较快且可逆，在较 宽的pH范围内CD稳定，不干扰UV检测且无毒 方法可分为两大类26：间接法和直接法。前者又称 性，但CD在甲醇中的溶解度较小〕〔。该法已用于分 手性试剂衍生化法，后者又可分为手性固定相法 离氨基酸及其衍生物、巴比妥类 （图1a 氯胺酮 （图 CSP）和手性流动相添加剂法 C（MPA）各种方法 1b）⒈酵子 ⒋晃铮ㄍ?2⑹宥 〈ㄍ?2⒚ 的优缺点已有文章叙述。本文重点讨论CMPA在药 妥因及其代谢物、哌嗪类镇痛药、甲基炔诺酮、伪麻 物对映体分析中的应用与分离原理。 黄碱、17-酮甾体、去甲羟基安定，采用的固定相常为 2 CMPA的种类 ODSCNC8，苯基，硅胶等，检测手段多用UV和 CMPA按其添加剂类型或分离原理可分为以 ECD916。 下几种。 2.1 手性包含复合 经常采用的添加剂是环糊精和手性冠醚 ?.〔7。环 糊精是一类环状低聚糖同系物由6 8个葡萄糖分 子经a-14键合生成环状分子，空腔内部由于含有 CH和糖苷结合的—O 原 而呈疏水性。D-吡喃型 葡萄糖23位上的 OH在空腔的开 口部，而 6位 上的 OH则位于另一开口部。因此环糊精对疏水 性和亲水性药物对映体都具有很强的包含作用，并 使包含物的理化性质发生改变。对映体分子进入环 糊精手性空腔后即发生主-客反应 如（各种疏水性、 氢键反应等）而被拆分。一般认为对映体分子中需要 能与环糊精上羟基缔合的基团。假设：流动相pH＜ pKa，环糊精不影响固定相的性质，则在色谱系统中 存在以下平衡 〕〔： 2.2 手性配合交换 配合物在生物系统中具有非常重要的作用，如 氨基酸和肽类的金属配合复合物、酶-金属-底物配 合物等。1979年Davankov将手性金属配合剂加入 HPLC流动相中，形成三元非对映体配合物。由于它 们结构稳定性和能量的差异，并与固定相发生立体 选择性吸引或排斥反应，使两对映体得以分离2〔4〕。 配合交换系统使用水性流