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水环境污染的分子生物标志物研究进展

水环境污染程度的分子生物标志物的研究进展摘要:介绍了抗氧化酶、非酶参与的小分子抗氧化物质、其他酶蛋白等作为分子水平上的生物标志物,在水环境污染早期诊断和生态风险评价中的研究现状及最新进展,并展望了分子生物标志物在水污染环境早期诊断和生态风险评价中的发展方向。关键词:生物标志物;抗氧化酶;小分子抗氧化物质;酶蛋白水生生物与其生存环境构成相互依赖、相互影响的动态系统,水体污染对水生生物产生威胁,同时生物也会做出相应的反应和变化。因此水生生物反应和变化可作为水环境评价的良好指标。目前广泛使用的污染指示生物有藻类、藤壶、浮游生物、软体动物、甲壳类、贻贝、牡蛎等,以及各种鱼类,特别是各种底栖鱼类,如:牙鲆、蝶类。近年来,细胞或分子水平上的生物标志物作为污染物暴露和毒性效应的早期预警指标受到广泛关注,并已成为国内外生态毒理学研究的热点之一,由于其具有特异性、预警性和广泛性等特点,在水环境生态风险评价中的应用日益广泛。国际毒理界对引起生物系统损伤的估算,包括污染物暴露、敏感性等生物标志物的研究极为重视。笔者侧重于介绍分子生物标志物监测水体中污染程度及评价污染物对水生动物生存危害性的研究进展。1 抗氧化酶用作生物标志物的研究抗氧化酶在参与活性氧的清除及机体的保护性防御反应中发挥巨大作用。超氧化物歧化酶(SOD)是最先与活性氧自由基作用的酶,它可将超氧阴离子(02-)分解为H202和02,过氧化氢酶(CAT)又可继续分解H202,从而降低体内H202的浓度。除过氧化氢酶外,谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)也可利用H202将还原型谷胱甘肽(GSH)氧化生成氧化型谷胱甘肽(GsSG)。谷胱甘肽硫转移酶(GST)作为第二阶段解毒酶,可催化污染物与GSH结合,生成极性小分子物质,从而减轻其毒性。生物体的抗氧化酶对污染物胁迫相当敏感,其活性变化可为污染物胁迫下的机体氧化应激提供敏感信息,因此,抗氧化酶被用作指示环境污染的早期预警,从而成为分子生态毒理学生物标志物研究的热点之一 。有机污染物如20 柴油和2, 二氯苯酚(2,4-DCP)在较低浓度下便可引起机体的氧化应激和氧化损伤_1l3_,SOD、GST和GSH等对2种污染物的响应都很敏感,柴油和2, 二氯苯酚在国家现行渔业用水标准以下(0.005 mg/L),都能引起抗氧化酶活性的改变。研究发现 ,cu在低于我国现行渔业水质标准(0.01 mg/L)时,能对GSF产生显著诱导,表明GST对Cu反应敏感,有潜力成为指示cu污染的生物标志物。然而,用抗氧化酶的活性变化来指示水环境污染,不同的实验室和野外研究得到的结果不尽相同,甚至相反。如未发现污染物胁迫下GST活性发生显著变化,相反,PCDDs、PAHs或一些杀虫剂胁迫下,红鳟鱼、鲈科鱼以及翻车鱼体内GSF活性降低。因此,GST能否作为理想的生物标志物指示环境污染还值得进一步研究。将SOD作为生物标志物研究时也出现类似的问题,Van der Oost总结了20多个实验室的研究结果,发现SOD在污染物胁迫下做出的响应不尽相同,60%多的实验室未发现SOD活性产生显著性变化,20%的实验室发现SOD产生诱导,而大部分的野外研究表明SOD活性出现诱导。对CAT的研究,超过50% 的实验室未发现CAT活性发生显著变化,大于20% 的实验室研究表明,CAT活性受到抑制,而小于20%的实验室研究表明,CAT活性产生诱导。以上结果表明,抗氧化酶用作环境污染的早期预警指标,必须考虑其他环境因素如温度、溶解氧等的影响。环境条件的微小差异都可能导致酶活性产生变化。另外,生物种属间的个体差异以及年龄、性别、不同生长发育阶段等也可能影响酶活性的检测结果。总之,将抗氧化酶,如SOD、CAT、GSF用作生物标志物指示环境污染的早期预警,需考虑多种因素的综合影响,在实验条件的操作上应严格控制,尽量减少可能产生的误差,以确保实验结果的真实可靠。2 非酶参与的小分子抗氧化物质用作生物标志物的研究非酶参与的小分子抗氧化物质在机体保护防御过程中也发挥了不可替代的作用,这类物质包括还原型谷胱甘肽(GSH)( J、抗坏血酸(Vf)、生育酚(vE)等。GSH是一种小分子三肽,作为机体抵抗污染胁迫的第一道防线,对机体起保护作用主要表现在2个方面,其一,在谷胱甘肽硫转移酶的催化作用下,作为外源性污染物及其体内代谢产物所产生的亲电中间体的结合靶点,降低污染物的生物毒性;其二,作为抗氧化剂保护机体因各种由生理及污染胁迫而造成的氧化应激及氧化损伤,在清除活性氧如H2()2及·OH过程中发挥重要作用。生物体遭受污染物胁迫时,GSH含量降低,大量活性氧产生并积累,使机体处于氧化应激状态,此时,体内正常的氧化还原电位平衡机制被扰乱,还原型谷胱甘肽向氧化型谷胱甘肽(GSSG)转化,GSSG含量升高。健康的生物体,GSH/

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