微生物分离和纯培养课件.ppt

第二章 微生物的纯培养和 显微技术;微生物的分离和纯培养;§1微生物的分离和纯培养;无菌技术;微生物纯种分离;单个微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到一定程度可以形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体，称为菌落(colony)。;一个菌落是一个纯种，也是一个纯培养； 单个微生物只在固体培养基上形成菌落； 在液体培养基中不会形成菌落;同一细菌在不同的培养平板上形成不同的特征菌落 ;一、用固体培养基（营养琼脂平板）分离纯种;微生物样品;（二）、纯种平板分离的不同方法;涂布平板法;2、稀释倒平板法（倾注平板法）（pour plate method);分区划线法（蛇形线法）操作图;分区划线法适用范围： 适用于浓度较大的样品;连续划线法操作图;培养严格厌氧微生物;二、用液体培养基分离纯化培养;培养物在液体培养基中进行高度顺序稀释，如果经稀释后的同一稀释度的大多数（95%以上）试管中没有微生物生长，有微生物生长的试管得到的培养物可能就是纯培养物。;上节课知识回顾;三、单细胞（单孢子）分离;个体较小的微生物需采用显微操作仪;Each colony was examined microscopically;四、选择培养分离;1、利用选择培养基进行直接分离;;含牛奶选择培养基目的菌生长平板;例二：分离筛选产高温淀粉酶（65℃）细菌;人为创造一些条件只让所需的微生物生长，在这些条件下，所需要的微生物能有效地与其他微生物进行竞争，在生长能力方面远远超过其他微生物。;例：从土壤中分离能产生?－半乳糖苷酶的微生物;如果培养物中只含有两种微生物，而且是有意识的保持两者之间的特定关系的培养物称为二元培养物。;微生物纯培养分离方法的比较;六、无菌技术;1、所用物品的灭菌技术;B、培养基或溶液的灭菌;C、血清或生长因子溶液灭菌;上节课知识回顾;2、接种;1.接种针 2.接种环 3.接种钩 4.接种锄 5.接种铲　6.接种匙 7.接种刀 8.接种刀　9.剪刀　10.钢钩　 11.镊子 12.弹簧接种枪　13.接种、枪（日本式） ;接种环的灭菌;挑选单个菌落;1、实验台 2、空气 ;七、微生物的保藏技术;传代培养保藏 冷冻保藏 干燥保藏 纸片保藏 薄膜保藏 寄主保藏;传代保藏;冷冻保藏;干燥保藏;标准菌株的保存使用;国内外菌种保藏部分情况;普通微生物菌种保藏管理中心(CCGMC)--中科院微生物所,北京(AS),真菌、细菌;中科院武汉病毒研究所,武汉(AS-IV),病毒。 农业微生物菌种保藏管理中心(ACCC)---中国农业科学院土壤肥料研究所,北京(ISF)。 工业微生物菌种保藏管理中心(CICC)---轻工业部食品发酵工业科学研究所, 南京(ID),真菌;卫生部药品生物制品检定所,北京(NICPBP),细菌；中国医学科学院病毒研究所,北京(IV),病毒。;抗菌素菌种保藏管理中心(CACC)---中国医学科学院抗菌素研究所北京(IA)；四川抗菌素工业研究所,成都(SIA),新抗菌素菌种;华北制药厂抗菌素研究所,石家庄(IANP),生产用抗菌素菌种。 兽医微生物菌种保藏管理中心(CVCC)---农业部兽医药品监察所,北京(CIVBP) 。 除了上述保藏中心外,我国从事微生物研究并保藏有一定数量各类专业用微生物菌种的科研单位、大专院校还有近百所。;世界55个国家的菌种保藏机构共352个,目前主要的菌种保藏机构有: 美国的“美国典型菌种收藏所”(ATCC)，保藏方式主要采用冷冻干燥和液氮超低温冻结法。 美国“农业研究服务部菌种收藏所”(ARS)设立在“北方地区研究室”(NRRL); 荷兰“真菌中心收藏所”(CBS); 日本“大阪发酵研究所”(IFO); 法国“里昂巴斯德研究所”(IPL); 西德 “柯赫研究所”(RKI); 苏联“苏联科学院微生物研究所”(IM)。 ;作业;上节课知识回顾