喜树碱与DNA相互作用的光谱学研究-发光学报.PDF

第３２卷　第１１期 发　光　学　报 Ｖｏｌ３２ Ｎｏ１１ ２０１１年１１月 ＣＨＩＮＥＳＥＪＯＵＲＮＡＬＯＦＬＵＭＩＮＥＳＣＥＮＣＥ Ｎｏｖ．，２０１１ 文章编号：１０００７０３２（２０１１）１１１１９７０７ 喜树碱与ＤＮＡ相互作用的光谱学研究 １ １ １ １ １ １，２ 于岚岚 ，杨　冉 ，白希希 ，陈晓英 ，李建军 ，屈凌波 （１．郑州大学 化学系，河南 郑州　４５０００１；　２．河南工业大学 化学化工学院，河南 郑州　４５００５２） 摘要：采用光谱法研究了抗癌药物喜树碱与ＤＮＡ的相互作用。ＤＮＡ引起喜树碱的吸收光谱轻微的红移和 减色并导致喜树碱的荧光猝灭，说明喜树碱和ＤＮＡ形成基态复合物。通过计算确定了二者的结合常数，结合 位点数及主要结合力。同时考察了离子强度、磷酸根浓度、猝灭剂ＫＩ对二者相互作用的影响并比较了单、双 链ＤＮＡ和喜树碱相互作用的程度。变性实验确定了喜树碱ＤＮＡ复合物的熔点为６０℃，比纯ＤＮＡ的熔点 低１８℃。实验结果表明喜树碱和ＤＮＡ之间主要是沟槽作用模式。 关　键　词：喜树碱；药物ＤＮＡ相互作用；荧光猝灭 中图分类号：Ｏ４８２．３１；Ｏ６５７．３　　　ＰＡＣＳ：８７．６４．Ｎｉ　　　ＰＡＣＣ：８７１５Ｍ　　　文献标识码：Ａ ＤＯＩ：１０．３７８８／ｆｇｘ１１９７ 逆地解离，这可能是这类嵌插剂往往具有毒性和 １　引　　言 ［３，６］ 致癌性的原因 。因此，对药物和ＤＮＡ作用模 ＤＮＡ是生命中重要的遗传物质，同时也是很 式的研究对于了解药物的机理以及评价药物潜在 多药物的靶点。药物与ＤＮＡ的相互作用近年来 的毒性均具有重要意义。 受到广泛的关注，因为二者的相互作用不仅有助 喜树碱（Ｃａｍｐｔｏｔｈｅｃｉｎ，ＣＰＴ）是从珙桐科植 于揭示药物的作用机理，同时对于新药的研发也 物喜树（Ｃａｍｐｔｏｔｈｅｃａａｃｕｍｉｎａｔａｄｅｃｎｅ）中分离出 ［１］ 具有重要的意义 。药物对生物大分子的亲和 来的具有抗癌活性的天然植物活性成分，从发现 力对于药理学和药物动力学的研究均具有重要的 起就获得了广泛的关注［７］。喜树碱的作用靶点 影响［２］。药物分子对目标 ＤＮＡ的强亲和力有利 为拓扑异构酶 Ｉ，该酶在肿瘤细胞中过度表达。 于提高药效，但对非目标ＤＮＡ的强亲和力则可能 喜树碱可与ＤＮＡ及拓扑异构酶Ｉ形成三元复合 引起ＤＮＡ构象和功能的改变，进而抑制 ＤＮＡ的 物，从而抑制 ＤＮＡ的解旋，导致 ＤＮＡ复制受阻， ［８９］ 表达、复制、转录及其他生物学过程，造成细胞中 进而造成细胞死亡 。尽管喜树碱表现出令人 毒。小分子和ＤＮＡ相互作用的模式包括嵌插作 振奋的抗癌活性，但是它亦引起了严重的副作用， ［３］ 用、沟槽作用和静电作用 。嵌插作用指的是小 如白细胞减少症、出血性膀胱炎等，因此极大地限 ［１０］ 分子（通常具有平面芳香结构）插入到螺旋的相 制了其在临床上的应用 。喜树碱的毒性可部 邻两个碱基对中。这种小分子（嵌插剂）包括溴 ［１０］