定点突变提高N-酰基高丝氨酸内酯酶酶活和温度稳定性.pdf

Ｒesearch Paper 研究报告 微生物学报 A cta M icrobiolog ica Sinica 54 (8) :905 － 9 12 ; 4 August 20 14 ISSN 000 1 － 6209 ; CN 11 － 1995 / Q http :/ / journals． im ． ac ． cn / actamicrocn doi : 10. 13343 / j ． cnki． wsxb ． 20 14 . 08. 008 N- 定点突变提 高 酰基 高丝氨酸内 酯酶酶活和温度稳 定性 ， ， ， ， 杨梅 谢 盼盼 简思美 林丽玉 杨彩 云 ， 350 108 福 建 师 范大学生命 科学学院 福 建 福 州 : 【 】 N - (N -acylhomoserine lactonase ，AiiA ) 。 【 】 摘要 目的 提 高 酰基 高丝 氨 酸 内酯 酶 酶活 及 温 度 稳 定 性 方 法 AiiA AiiA ， AiiA 本研究 基 于 同源 蛋白 的三 维 结构对 进 行 定 点突 变 分 析 野 生 型 及其 突 变 蛋白酶活和 温 度 稳 。 【 】 AiiA ， 45 ℃ 30 min ， 4 ℃ 5 d N - 定性 结果 野 生型 较 不稳 定 在 下温浴 或 储存 后均失 去 降解 酰基 高丝氨 酸 内酯 (N -acylhomoserine lactone ，AHL) 的活性 。但 是突变 AiiA 蛋白 (N65 K ，T 195 Ｒ 和 A206 E) 的酶活力较 野 AiiA 20 % ， 4 ℃ 7 d 。 ， N65 K AiiA 生型 均提 高 了 以上 且 储存时间 延长 到 此外 突变株 比野 生型 对 高温 具有 更 ， 45 ℃ 45 % ，55 ℃ 30 min 5. 0 % 。 【 】 强 的耐受性 在 温 浴 后剩 余 酶活力达 到 以上 温 浴 后 仍保 留 的酶活力 结论 AiiA ， AiiA 。 通 过定 点突变 改造 蛋白结构 提 升 了 蛋白 的酶活和温 度 稳 定性 :N - ，N - ， ， 关键词 酰基 高丝氨 酸 内酯 酰基 高丝氨 酸 内酯 酶 酶 学特 性 定 点突变 中图分类号 :Q8 14 文章编号 :000 1-6209 (20 14 )08