牦牛和犏牛Dmc1基因序列分析及睾丸组织转录水平研究_李贤.pdfVIP

中国农业科学 2010,43(15):3221-3229 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2010.15.021 牦牛和犏牛Dmc1基因序列分析及睾丸组织转录水平研究 1 1 2 1 1 1 1 1 李 贤 ，李齐发 ，赵兴波 ，徐洪涛 ，顾 垚 ，朱 翔 ，谢 庄 ，刘红林 1 2 （南京农业大学动物科技学院，南京 210095 ； 中国农业大学农业生物技术国家重点实验室，北京 100094 ） 摘要：【目的】研究牦牛和犏牛Dmc1基因编码区序列、结构和睾丸组织mRNA表达水平，探讨Dmc1基因与犏 牛雄性不育的关系，为揭示犏牛雄性不育的分子机理提供参考。【方法】通过PCR扩增和克隆测序获得牦牛和犏牛 Dmc1基因部分 cDNA序列，运用生物信息学方法分析牦牛和犏牛Dmc1基因编码区序列、蛋白结构和进化关系，利 用实时荧光定量 PCR 技术检测牦牛和犏牛睾丸组织中 Dmc1 基因 mRNA 表达水平。【结果】牦牛和犏牛 Dmc1 基因编 码区序列全长均为 1 023 bp，编码 340 个氨基酸，与黄牛 Dmc1 基因的同源性为 100%，与哺乳纲其它物种的同源 性在90%以上。牦牛和犏牛Dmc1蛋白含有RecA蛋白家族典型的第二结构域，且与人、鼠Dmc1蛋白结构域一致。 系统发育分析显示牦牛、犏牛和黄牛首先聚为一类，后与家犬相聚；人、黑猩猩和猕猴聚为另一类，而与鸟纲动 物相聚较远，与经典分类基本一致。定量结果显示犏牛睾丸组织 Dmc1 基因 mRNA 表达水平较低，与牦牛差异极显 著（P ＜0.01），且犏牛表现出来的减数分裂障碍表型与小鼠 Dmc1 基因突变或敲除的表型一致。【结论】根据生 物信息学分析结果推测牛 Dmc1 蛋白与人、鼠一样，在精母细胞减数分裂同源重组过程中发挥着重要作用；Dmc1 基因在牦牛和犏牛睾丸组织中的表达量差异极显著（P ＜0.01），结合犏牛雄性减数分裂障碍表型，表明睾丸组织 Dmc1基因可能与犏牛的雄性不育有一定的关系。 关键词：牦牛；犏牛；Dmc1；雄性不育；克隆；序列分析；mRNA表达 Sequence Analysis and Study on the Expression Level of Dmc1 mRNA in Yak and Cattle-Yak Testis 1 1 2 1 1 1 1 1 LI Xian , LI Qi-fa , ZHAO Xing-bo , XU Hong-tao , GU Yao , ZHU Xiang , XIE Zhuang , LIU Hong-lin 1 2 ( College of Animal Science and Technology, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095 ; State Key Laboratory for Agro-Biotechnology, China Agricultural University, Beijing 100094) Abstract: 【Objective 】 The study was aimed to investigate