CIK细胞的作用机制和研究现状.doc

CIK细胞治疗肿瘤的作用机制和发展现状 姓名：吴建军 摘要：CIK细胞是细胞因子诱导的杀伤细胞，它能够同时表达CD3 和CD56 两种膜蛋白分子, [1]既具有T 淋巴细胞强大的杀伤活性，也具有自然杀伤细胞杀伤时的非MHC限制性。与其他过继性免疫治疗细胞相比,CIK细胞具有增殖速度快、杀瘤活性高、杀瘤谱广、副作用小、对正常骨髓造血的影响轻微等优点，被认为是新一代肿瘤过继免疫治疗的首选方案。 关键词： CIK细胞 自然杀伤细胞 外周血单个核细胞（PBMC）,其死亡率居各种疾病的第2 位, 并且在我国仍呈现出上升趋势。 随着肿瘤对人类生存健康的威胁日益严重,应对肿瘤的治疗模式也发生着日新月异的变化,各种肿瘤治疗的新药物、新技术、新方法层出不穷,其中细胞生物治疗已经初露锋芒,成为肿瘤生物治疗中重要的发展方向。继淋巴因子激活杀伤细胞(LA K) 、浸润肿瘤淋巴细胞( TIL) 及CD3 单抗激活的杀伤细胞后,细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine induced killer ,CIK) 的杀瘤作用日益受到重视。 CIK 细胞最早是1991 年由美国斯坦福大学Schmidt Wolf 等[2] 首次报道，他们发现在多种细胞因子(INF-γ、CD3 单抗、IL-1α 和IL-2)的作用下,外周血淋巴细胞可以被定向诱导并大量增殖成为肿瘤杀伤细胞。由于该种细胞同时表达CD3 和CD56 两种膜蛋白分子,因此具有T 淋巴细胞强大的抗瘤活性和自然杀伤细胞的非MHC限制性杀瘤的优点。 与其他过继性免疫治疗细胞相比,CIK细胞具有增殖速度快、杀瘤活性高、杀瘤谱广、副作用小、对正常骨髓造血影响轻微等优点。因此, CIK细胞被认为是抗肿瘤过继细胞免疫治疗的新希望。 CIK细胞治疗肿瘤的优点 CIK细胞增值活性高 通过INF-γ、CD3 单克隆抗体、IL-1α和IL-2诱导外周血或脐血中的单个核细胞，生成免疫活性更大的CIK细胞，经过2～3周的扩增，CIK细胞的数量可达20～100倍左右，平均增加约25倍。经扩增后的达到近似疗效所需的细胞数较之LAK细胞约小1～2个数量级，[3,4]而且在体内应用时完全无需联合使用重组人IL-2,避免了产生相关的不良反应。CIK细胞的高增殖活性解决了体外扩增效应细胞所获细胞数量少的难题。[5] CIK细胞杀瘤活性强 CIK细胞中主要以CD3+CD56+T细胞为效应细胞。实验证明，CD3+CD56+细胞主要来源于单个核细胞中的T细胞（CD3+CD56-），而非NK细胞（CD3-CD56+）。因为同时具有NK细胞的表型特征（CD56+））））））））） 穿孔素在Ca2+存在的条件下可以插入靶细胞膜，并多聚化形成管状结构，破坏靶细胞膜的结构。而颗粒酶是一类丝氨酸酯酶，进入胞浆后可以直接活化胞浆中的蛋白酶，使细胞发生凋亡）Xl,DAD1和survivin基因表达上调，从而诱导肿瘤细胞凋亡。[12]另外，CIK细胞识别靶细胞后，细胞表面表达的高水平FasL与靶细胞表面的Fas相互识别，通过Fas触发靶细胞内部的凋亡程序，使靶细胞发生程序性细胞死亡。CIK细胞输注体内后,在宿主机体状态或肿瘤抗原刺激下转变成具有杀瘤活性的细胞毒性T细胞,使T细胞增殖活化，发挥抗瘤作用。[13] 4 CIK细胞杀伤肿瘤细胞的发展现状 4.1 DC细胞和CIK细胞共培养 树突状细胞（DC）是最有效的专职抗原提呈细胞，成熟的DC细胞可通过Ⅱ型组织相容性抗原（MHC-Ⅱ）等途径提呈肿瘤抗原，有效的抵制肿瘤细胞的免疫逃避机制。CIK细胞和DC细胞是肿瘤免疫治疗的两个重要部分，两者联合可以确保高效的免疫反应。[14]研究表明，DC细胞能够诱发肿瘤宿主对特异性抗原的免疫应答，提高肿瘤宿主免疫效应细胞的细胞毒活性。Marten[15]等将外周血来源的CIK细胞和同源DC细胞共培养一段时间后，发现DC和CIK细胞的增殖能力明显增强，共培养14天后，CIK细胞的增殖倍数比共培养7天时高出2倍左右。共培养24小时后，DC细胞白细胞介素-12的分泌量是单培养时的对6.93倍。与DC细胞共培养的CIK细胞对肿瘤细胞的杀伤活性显著提高。因此，对DC细胞共培养的CIK细胞的研究将成为细胞免疫治疗的重点。 4.2 细胞因子基因的转染技术 由于CIK细胞的扩增对外源性细胞因子的依赖性，因此通过基因转染的方法将相关基因转入CIK细胞，不仅可以减少外源性细胞因子的使用量，还可以提高CIK细胞自身的抗瘤活性。[16] Lu[17]等发现CIK细胞培养过程中CD56分子的表达是IL-2依赖性的，但单独IL-2的存在却会降低培养后CIK细胞的表型变化幅度。Schmidt-Wolf[18]将包含人IL-2基因片段的重组质粒用电穿孔法导入CIK细胞治疗转移性实体瘤，发现转染后细胞