急性亚极限强度对运动员机体免疫抑制蛋白水平影响.doc

急性亚极限强度对运动员机体免疫抑制蛋白水平影响【摘　要】实验以急性亚极量强度跑台运动为主要研究方法，研究急性亚极量强度运动，是否也能够诱发ISPS的产生，并导致机体免疫机能的变化。研究结论如下：（1）急性亚极量强度运动应激后24小时，受试者血清中sIL-2R值明显升高；（2）急性亚极量强度运动应激后24小时，ISPS水平升高，对正常小鼠ConA诱导的淋巴细胞增殖产生明显的抑制作用；（3）急性亚极量强度运动应激后24小时，受试者机体的免疫功能受到抑制。实验证明了在急性亚极量强度运动应激24小时后，与运动前相比，运动后24小时，sIL-2R表达明显升高，表明机体内T淋巴细胞处于过度激活状态。与运动前相比，运动后淋巴细胞的转化受到明显的抑制，表明这种亚极量强度的运动可以导致机体内ISPS水平升高；而ISPS和sIL-2R的增加可以使淋巴细胞的功能受到抑制，使运动后机体过度激活的免疫机能得以保护。研究结果为今后在运动实践中应用ISPS监测运动员免疫机能提供了进一步的理论基础。 【关键词】急性亚极限强度；运动员；机体免疫抑制蛋白 剧烈的训练期和紧张的比赛期，运动员免疫机能低下，运动员患感冒、低烧、咽喉肿痛等的发病率增高，这已经成为严重削弱运动员体能，影响竞技能力的关键因素之一。围绕运动性免疫机能低下，人们已经进行了许多研究[1][2][3][4]，但问题远未解决。运动后免疫指标出现变化，可以涉及到免疫细胞、免疫球蛋白和免疫细胞因子等众多方面。 运动应激可使机体血清产生免疫抑制因子ISPS，这是机体对运动应激不适应的反应，可以抑制T、B淋巴细胞转化，抑制T细胞产生IL-2。矫玮（1998）[5]在人体上首先发现剧烈运动可以使体内产生免疫抑制因子，由应激产生的免疫抑制因子与机体的抵抗力有密切关系，是机体对运动应激不适应的一种表现，血清中这种抑制因子的产生可作为一个窗口（Window）反映机体抵抗力的变化。免疫抑制因子有可能是竞技体育运动员在体力负荷与精神压力的双重应激下机体免疫功能降低、抵抗力下降的物质基础。应激免疫抑制因子很可能是能够检测运动员免疫机能低下的理想指标，运动员体内出现免疫抑制因子，正是机体对运动应激不适应的结果，因为用现在的研究手段，在正常人体内检测不到ISPS。从人体研究来看，目前最短的运动诱导ISPS产生的时间为7天，在急性运动后短时间ISPS是否能在人体内出现，这还需要进一步研究确定，这将为应用ISPS在更大范围内检测人体的免疫机能提供实验依据，也有助于进一步了解ISPS产生的运动条件，本实验从这方面进行了研究。 1.研究对象与方法 1.1研究对象 河南省某体育学院运动训练专业研究生8名，男性，所有受试者均无运动训练史，运动实验前无感冒、发烧、咽喉肿痛等现象。受试者在实验前三天禁止进行运动练习。基本情况见表1。 表1　研究对象的基本情况 注：平均数±标准差 1.2研究方法 受试者于试验前一天，测安静心率，做跑台运动一次，运动强度控制在最大储备心率的（80-85）%，确定适宜的跑速。正式试验开始，受试者以计算心率运动，出现极度疲劳，不能坚持时，可以休息1次，待心率达120次/分以下时继续运动，运动情况见表2。 表2　受试者运动情况（N=8） 注：平均数±标准差★：疲劳以自我用力感觉量表R.P.E=17为标准。 受试者于运动前安静时，运动停止后24小时分别无菌抽取肘静脉血。血液置4℃6小时凝固后离心（4℃，3000rpm，30min）分离血清[7]，血清于-70℃存待用。 2.指标测试仪器与方法 2.1主要仪器及试剂 CS-15R超速离心机、CO2细胞培养箱 、多头细胞收集仪 、刀豆蛋白A（ConA）、RPMI1640培养粉、小牛血清、胸腺嘧啶核苷（3H-TdR）、人sIL-2R ELISA试剂盒。 2.2指标检测方法 2.2.1可溶性白介素-2受体（sIL-2R） 原理：双抗体夹心ELISA法。 用抗人sIL-2R单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的sIL-2R与单抗结合，加入生物素化的抗人sIL-2R抗体，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的亲和素与生物素特异性结合。加入显色剂，若反应孔中有sIL-2R，将有蓝色出现，加终止液变黄。在450nm处测OD值，sIL-2R浓度与OD450值成正比，通过绘制标准曲线求出标本中sIL-2R的浓度。 2.2.2运动员血清对正常小鼠淋巴细胞增殖抑制的作用 取正常BaLB/C雄性小鼠（体重20-22g），颈椎脱位处死，无菌操作下取脾脏，使用完全1640液制成单细胞悬液，使用显微镜进行镜下细胞计数，配制细胞浓度为3×106个/ml。培养液为RPMI1640（GIBCO公司产品）含10%小牛