浙江省高考生物-第10单元-现代生物科技专题-第36讲-基因工程课件.pptVIP

解析　若用两种识别切割序列完全不同的限制性核酸内切酶E和F从基因组DNA上切下目的基因，并将之取代质粒pZHZ1(3.7 kb,1 kb＝1 000对碱基)上相应的E～F区域 (0.2 kb)，那么所形成的重组质粒pZHZ2既能被E也能被F切开，故A正确。 3.(2016·浙江4月选考)兔肝细胞中的基因E编码代谢甲醛的酶，拟利用基因工程技术将基因E转入矮牵牛中，以提高矮牵牛对甲醛的代谢能力。请回答下列问题： (1)从兔肝细胞中提取mRNA，在______酶的作用下形成互补的DNA，然后以此DNA为模板扩增得到基因E。在相关酶的作用下，将基因E与Ti质粒连接在一起，形成____________，再导入用氯化钙处理的______， 逆转录 重组DNA分子 农杆菌 答案 侵染矮牵牛叶片。将被侵染的叶片除菌后进行培养，最终得到转基因矮牵牛。其中培养过程正确的是____。 A.叶片在含合适浓度生长素的培养基上分化形成愈伤组织 B.愈伤组织在含细胞分裂素和生长素配比较高的培养基上形成芽 C.再生的芽在细胞分裂素含量高的培养基上生根 D.愈伤组织在含合适浓度植物生长调节剂的培养基上脱分化形成再生植株 解析 √ 解析　以mRNA为模板合成DNA的过程为逆转录过程，这一过程需要在逆转录酶的催化下进行。获得目的基因后，需在限制性核酸内切酶和DNA连接酶的作用下，将目的基因与载体(Ti质粒)连接形成重组质粒(重组DNA分子)，再将其导入受体细胞。将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法，先将重组DNA分子导入经氯化钙处理的农杆菌中，再用导入目的基因的农杆菌感染植物细胞，最终实现将目的基因导入植物细胞内的目的。导入目的基因的植物细胞经组织培养过程形成转基因植株。组织培养过程中，叶片在含适宜浓度的生长素和细胞分裂素的培养基上脱分化形成愈伤组织，然后在含细胞分裂素和生长素配比较高的培养基上形成芽，继而在生长素含量高的培养基上生根，最后形成完整的植株，愈伤组织形成植株的过程中发生细胞的分化。 (2)取转基因矮牵牛叶片，放入含MS液体培养基和适量浓度甲醛且密封的试管中。将试管置于____上，进行液体悬浮培养。一段时间后测定培养基中甲醛的含量，以判断基因E是否在转基因矮牵牛中正常表达。培养过程中液体培养的作用：一是提供营养；二是__________，从而使叶片保持正常的形态。 解析　植物组织培养过程中，将愈伤组织等细胞置于摇床上，进行液体悬浮培养，形成多个分散的细胞。培养过程中培养液一方面为植物细胞提供营养，另一面维持一定的渗透压，从而使叶片保持正常的形态。 摇床 维持渗透压 解析答案 4.(2016·福州三模)1978年，人类首次利用转基因技术生产人胰岛素，其过程大致如图所示： (1)人胰岛素由A、B两条肽链组成，可根据组成肽链的氨基酸序列，确定编码胰岛素基因的碱基序列，因此可通过________方法获得目的基因。 解析　人工合成该目的基因的方法有两种：逆转录法和化学合成法，题中根据人胰岛素由A、B两条肽链的氨基酸序列，确定编码胰岛素基因的碱基序列，再通过人工合成方法获得目的基因属于化学合成法。 人工合成 解析答案 (2)β--半乳糖苷酶能将无色ONPG分解，产物呈黄色，本生产流程中β--半乳糖苷酶基因作为________，通过①和②，完成基因表达载体的构建，写出该过程处理DNA分子所需要的酶：____________________________。 解析　根据题意分析，胰岛素基因为目的基因，β--半乳糖苷酶基因为标记基因，通过①和②过程构建重组DNA分子时，需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶的参与。 标记基因 限制性核酸内切酶和DNA连接酶 解析答案 (3)③表示将重组DNA分子导入受体细胞，用Ca2＋处理大肠杆菌，目的是使之变为_______细胞，利于外源DNA侵染，④表示利用化学方法催化二硫键的形成，合成具有生物活性的胰岛素，人体内该过程在胰岛β细胞的______中进行。 解析　基因工程中若将重组DNA分子导入大肠杆菌细胞中，则通常采用CaCl2溶液处理大肠杆菌，使其成为感受态细胞，利于外源DNA侵染。胰岛素的化学本质是蛋白质，在核糖体合成后需要内质网的加工，才具有生物活性。 感受态 内质网 解析答案 返回 一、选择题 1.(2015·浙江五校联考)通过基因工程生产转基因小鼠，其核心是构建重组DNA分子，所需工具除了载体、限制性核酸内切酶外，还需要(　　) A.DNA聚合酶 B.DNA连接酶 C.RNA聚合酶 D.解旋酶 解析　限制性核酸内切酶将目的基因和载体切出相同的粘性末端后，需要DNA连接酶将二者的末端进行拼接。 解析 √ 2.(2015·金华模拟)下列选项中，能正确表示基因工程操作“五步曲”的是(　　) A.获得目的基因→将重组