CTGF mRNA在糖尿病大鼠心肌中的表达及葛根素和氨基胍的调节作用.doc

　　CTGF mRNA在糖尿病大鼠心肌中的表达及葛根素和氨基胍的调节作用 【摘要】 目的 ：观察结缔组织生长因子(CTGF)在糖尿病大鼠心肌组织中的表达情况及葛根素(Pue)、氨基胍(AG)对CTGF表达的调节作用。方法：给大鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制备糖尿病模型，用葛根素(Pue1组，160 mg·kg-1·d-1;Pue2组，120 mg·kg-1·d-1;Pue3组，80 mg·kg-1·d-1)、氨基胍(AG组，100 mg·kg-1·d-1) 治疗 12周;采用RT-PCR检测心肌组织CTGF mRNA的表达，透射电镜下观察心肌细胞的形态学改变。结果：糖尿病组大鼠心肌组织CTGF mRNA的表达升高，Pue2组、Pue3组和AG组CTGF mRNA的表达明显降低;电镜下可见糖尿病组大鼠心肌细胞肌原纤维含量明显减少，治疗组大鼠心肌病变明显减轻。结论：葛根素(120和80 mg·kg-1·d-1)和氨基胍能下调CTGF mRNA的表达，对糖尿病大鼠心肌具有保护作用。 【关键词】 结缔组织生长因子;葛根素;氨基胍;糖尿病;心肌;基因;大鼠 　　Abstract: Objective: To observe the mRNA expression of the connective tissue groyocardial tissue in rats ellitus (DM) and the adjusling effects of puerarin (Pue) and aminoguantdine (AG) on CTGF expression.Methods: The diabetes mellitus (DM) rats models ade by intraperitoneal injection of streptozotocin (60 mg/kg body RNA of myocardial tissue ined erase chain reaction (RT-PCR). Morphology of myocardium of rats ission electron microscope (TEM). Results: The CTGF mRNA expres-sion g·kg-1·d-1、80 mg·kg-1·d-1)and AG treated groups (Plt;0.01). It shoyofibrilla contents in myocardial cell decreased significantly under TEM in diabetic group. The pathological changes of myocardium yocardium of diabetic rat may be doRNA expression. 　　Key inoguanidine;diabetes mellitus; myocardium;gene expression;rat 　　糖尿病心肌病(DCM)是糖尿病最常见的慢性并发症之一，被认为是糖尿病死亡的首要因素。已有研究表明，糖尿病心肌病变以舒张功能异常为早期临床特征，间质纤维化是其发生的主要原因[1]。结缔组织生长因子(CTGF)是新近发现的与纤维化形成密切相关的细胞因子[2]。近年来有研究提示CTGF参与了心肌纤维化的发生[3-4]。本研究观察了CTGF在糖尿病大鼠心肌组织中的表达情况以及葛根素和氨基胍对CTGF mRNA表达的影响。 　　 1 材料和方法 　　1.1 动物、试剂与仪器 清洁级(II级)Sprague-Daa公司产品，葛根素注射液(2 mL:0.1 g)为浙江康恩贝制药有限公司产品;Trizol reagent RNA提取试剂盒、RT-PCR试剂盒、DNA Marker由宝生物工程(大连)有限公司提供;CTGF及GAPDH(3-磷酸甘油醛脱氢酶)引物序列由上海生物工程技术服务有限公司合成;血糖仪及测试条由强生( 中国 )医疗器材有限公司提供。 　　1.2 动物分组和处理 随机取10只大鼠作为对照组(C组)，余60只大鼠禁食12 h后，用链脲佐菌素60 mg/kg一次性左下腹腔注射，72 h后取尾血用快速血糖仪测血糖，≥16.8 mmol/L为糖尿病大鼠。成模后再将糖尿病大鼠随机分为5组：糖尿病组(DM组)、葛根素高剂量(160 mg·kg-1·d-1)治疗组(Pue1组)、葛根素中剂量(120 mg·kg-1·d-1)治疗组(Pue2组)、葛根素低剂量(80 mg·kg-1·d-1)治疗组(Pue3组)、氨基胍治疗组(AG组，100 mg·kg-1·d-1)。C组及DM组每天腹腔注射丙二醇，容积为2