HMGCoA还原酶抑制剂阿托伐他汀对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其机制.doc

　　HMGCoA还原酶抑制剂阿托伐他汀对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其机制 ：赵锡丽，徐蔚蔚，蒋国萍，刘小兰，戟芳 【摘要】 目的 探讨HMGCoA还原酶抑制剂阿托伐他汀对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其可能的机制。方法 采用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射法复制大鼠糖尿病(DM)模型，成功后随机分为模型对照组和阿托伐他汀 治疗 组，另设正常对照组，每组8只大鼠。于处理后的第1、2、4、8周分别检测各组大鼠的24h 尿白蛋白(UAL)、尿素氮(UN)和肌酐(Cr)水平。第8周，取大鼠肾组织和外周血。采用GCoA还原酶抑制剂阿托伐他汀可能通过抑制TGFβ1/Smad信号通路，从而达到对糖尿病大鼠肾脏的保护作用。 【关键词】 阿托伐他汀;糖尿病;大鼠;肾功能;TGFβ1/Smad信号通路 　　ABSTRACT: Objective To investigate the protective effects of hydroxymethylglutaryl coenzyme A (HMGCoA) reducase inhibitor atorvastatin on nephridial tissues of diabetic rats and its possible mechanism. Methods Streptozotocin (STZ) ellitus (DM) model. Then the rats ized into model group and atorvastatin treatment group after the establishment of DM model. Meanal control group in (UAL), urea nitrogen (UN) and creatinine (Cr) during 24h ent. After 8ent, the rats ples PB. eanent efficiently reduced LN level pared odel control group (Plt;0.05). Conclusion HMGCoA reducase inhibitor atorvastatin might protect nephridial tissues of diabetic rats via suppressing TGFβ1/Smad signal transduction pathad signal pathad)信号通路有密切的关系[5]。 　　近来研究发现，脂质代谢紊乱是DN 的重要危险因素之一[6]。研究表明，高脂可作为始动因素对肾脏具有直接致病性，其机制可能与TGFβ1/Smad信号通路的激活相关[7]。基于上述研究，我们采用具有降血脂作用的HMGCoA还原酶抑制剂阿托伐他汀作用于糖尿病大鼠，探讨其对TGFβ1/Smad信号通路的影响，从而为临床应用阿托伐他汀治疗DN提供一定的理论和实验依据。 　　1 材料与方法 　　1.1 动物模型的复制及分组给药 雄性 SD大鼠30只，体重(210±10)g，购于第三军医大学实验动物中心，分笼饲养在22～28℃动物室中，给予标准鼠食及自由饮水。适应性饲养1周后随机选取20只大鼠，采用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射法复制糖尿病模型。大鼠随机血糖均大于16.7mmol/L，持续2周以上，即表明模型复制成功。非糖尿病(正常)SD大鼠枸橼酸盐缓冲液(0.1mol/L、pH 4.5)腹腔内注射。将阿托伐他汀用生理盐水稀释成0.5mg/mL备用。正常对照组不予任何处理;阿托伐他汀治疗组予以10mg/kg灌胃，模型对照组给予相同容积的生理盐水灌胃，连续8周。 　　1.2 药品及主要试剂 阿托伐他汀钙片购自北京红惠生物制药股份有限公司;STZ购自Sigma公司;尿微量白蛋白测定试剂盒、肌酐测定试剂盒均购于中生公司;血清层粘连蛋白(LN)放免试剂盒由上海海军医学研究所提供。TGFβ1 SABC免疫组织化学试剂盒购自武汉博士德生物公司;IRA plus全自动生化分析仪(瑞士);MiniPROTEAN 3小型垂直电泳槽、Smart SpecTM 3000型核酸蛋白定量分析仪、785型真空转膜仪(美国BioRad公司);RM2135型超薄组织切片机、DMIRB型倒置显微镜、MPS30型照相机(德国Leica公司)。 　　1.4 样本收集 于给药处理后第1、2、4、8周将各组大鼠按组别依次放入代谢笼中，收集24h尿，检测尿蛋白(UAL)、尿素氮(UN)水平;尾静脉采血检测肌酐(Cr)含量。于末次给药后12h，麻醉大鼠，取外周血并在4℃下、3000r/min离心10min分离血清，-20℃贮存