SORL1基因多态性与散发性阿尔茨海默病关联分析.doc

　　SORL1基因多态性与散发性阿尔茨海默病关联分析 ：伍力 王燕 李超 伍星 余发春 【摘要】 　　目的 分析SORL1基因多态性与散发性阿尔茨海默病（SAD）是否存在关联。方法 采用聚合酶链反应限制性片段长度多态性（PCRRFLP）技术，检测114例SAD患者及111例健康对照者的SORL1基因多态性分布特征。结果 SAD组与对照组SORL1基因型及等位基因频率分布差异无统计学意义（χ2＝1.693，P=0.429，χ2＝0.965，P=0.326）。不同性别的SAD组与对照组SORL1基因型及等位基因频率分布差异无统计学意义（男性：χ2＝2.324，P=0.313，χ2＝1.667，P=0.197；女性：χ2＝2.878，P=0.237，χ2＝0.058，P=0.810）。结论 亚洲汉族人群SORL1基因rs641120位点的A/G SNP多态性与SAD可能无关联。 【关键词】 阿尔茨海默病；基因表达；多态现象；遗传 　　阿尔茨海默病（AD）是一种多因素引起的原发性退行性脑变性疾病，病因未明〔1〕。AD患者中，除少数为家族性外，绝大多数为散发性。散发性阿尔茨海默病（SAD）的发病是多个基因和环境因素共同作用的结果。目前，定位于19号染色体的载脂蛋白E（APOE）ε4等位基因作为AD的危险因子已得到广泛认同〔2〕，但ε4等位基因并非AD发病的充要条件〔3〕，其发病因素仅占了45%～60%，由此可见尚有其他危险因素参与了AD的发病。研究发现遗传性或获得性的SORL1受体表达或功能改变，可能涉及AD发生的机制〔4，5〕。本研究通过对SAD患者SORL1基因进行多态性检测，探讨SORL1基因多态性与SAD是否存在关联。 　　 1 对象与方法 　　1.1 对象 　　114例SAD患者为2006年9月至2008年3月在我院门诊及住院的患者，各患者间无亲缘关系，其中男44例，女70例，年龄63～85岁，平均(75.1±6.1)岁。均符合 中国 精神疾病分类方案与诊断标准第三版和美国精神障碍诊断和统计手册第4版(DAMⅣ)的AD诊断标准〔6〕。符合MMSE评分文盲患者≤17分，小学文化患者≤20，中学及以上文化程度患者≤24分。采用Hachinski缺血指数量表结合大脑影像学资料鉴别血管性痴呆和AD，排除抑郁症所引起的假性痴呆，排除其他神经系统疾病、系统性疾病和物质中毒所致的痴呆，排除正处于心、血管、肺、肝、肾等重大躯体疾病急性期的患者。111例健康对照老年人选自社区，满足MMSE评分文盲患者≥17分，小学文化患者≥20，中学及以上文化程度患者≥24分。男性41例，女性70例，年龄62～87岁，平均(73.6±6.3)岁。排除正处于心、血 管、肺、肝、肾等重大躯体疾病急性期的患者。两组间的年龄、性别差异无统计学意义。 　　1.2 方法 　　1.2.1 位点 　　SORL1 基因接近5′端的rs641120 (A/G)SNP多态性位点。 　　1.2.2 引物 　　上游引物：5′CATGATCCAAATTATATGTGAAAAATTCAAT 3′，错配引物设计，将A转换为C，引入一个MunⅠ（MfeⅠ）的酶切识别序列：C∨AATTG；下游引物：5′CCCAAGAACATCAGGACACCAAC 3′，扩增产物长度为：181 bp。 　　1.2.3 PCR反应条件 　　95℃预变性5 min，然后按96℃ 45 s，62℃ 30 s，72℃ 1 min，循环35次，末次循环后72℃延伸5 min，产物经含EB的2%的琼脂糖凝胶电泳检测。 　　1.2.4 SORL1基因rs641120 (A/G)SNP/MunI限制性片段长度多态性(RFLP)分析 取10 μl扩增产物，加入8个单位MunⅠ内切酶及其缓冲液，37℃消化3 h。3%的琼脂糖凝胶电泳，分离酶切产物片段。溴化乙啶染色后在紫外透射反射仪下分析电泳结果。 　　1.2.5 验证结果 　　各基因型随机抽取5例样本进行基因测序，验证酶切结果。x 【关键词】 阿尔茨海默病；基因表达；多态现象；遗传 　　阿尔茨海默病（AD）是一种多因素引起的原发性退行性脑变性疾病，病因未明〔1〕。AD患者中，除少数为家族性外，绝大多数为散发性。散发性阿尔茨海默病（SAD）的发病是多个基因和环境因素共同作用的结果。目前，定位于19号染色体的载脂蛋白E（APOE）ε4等位基因作为AD的危险因子已得到广泛认同〔2〕，但ε4等位基因并非AD发病的充要条件〔3〕，其发病因素仅占了45%～60%，由此可见尚有其他危险因素参与了AD的发病。研究发现遗传性或获得性的SORL1受体表达或功能改变，可能涉及AD发生的机制〔4，5〕。本研究通过对SAD患者SORL1基因进行多态性检测，探讨SORL1基因多态性与