乳腺癌患者血浆RASSF1A基因启动子甲基化的意义.doc

　　乳腺癌患者血浆RASSF1A基因启动子甲基化的意义 【摘要】 　　目的： 探讨乳腺癌患者血浆、肿瘤组织中RASSF1A基因启动子甲基化与临床病理等因素的相关性. 方法： 采用甲基化特异性PCR方法，分别检测68例乳腺癌患者血浆、肿瘤组织及癌旁腺体组织，以及12例良性乳腺疾病患者的血浆和乳腺组织中RASSF1A基因启动子甲基化状况. 结果： 乳腺癌组织RASSF1A基因启动子甲基化频率47.1%（32/68），患者血浆中同样DNA变异检出率33.8%（23/68）. 血浆中DNA甲基化状况与乳腺癌组织的甲基化状况显著相关（r=0.906, P=0.001）. 检测血浆中RASSF1A基因启动子甲基化的敏感性71.8%，特异性97.2%，肿瘤组织及血浆中游离DNA甲基化异常与临床分期，病理类型，肿瘤大小，ER，PR和cerbB2状况无相关性（Pgt;0.05）. 乳腺癌组织中未检测到RASSF1A基因启动子甲基化的血浆中、乳腺良性疾病患者血浆中均未检测到该基因甲基化变异. 结论： 乳腺癌患者血浆中RASSF1A基因启动子甲基化与肿瘤组织中的变异频率相关. 【关键词】 乳腺肿瘤；RASSF1A基因；甲基化 　　【Abstract】 AIM: To investigate the relationship betoter methylation of tumor suppressor gene RASSF1A in plasma and clinicopathological features of breast cancer. METHODS: Methylation specific PCR easure the promoter methylation status in plasma， paired tumor tissue and paracancerous normal tissue of 68 patients a and mammary gland of 12 patients oter hypermethylation or tissue and 33.8%(23/68) in paired plasma. RASSF1A gene hypermethylation in plasma or tissue ( r=0.906, P=0.001). The sensitivity of RASSF1A gene hypermethylation detection in plasma ethylation of RASSF1A gene in tumor tissue and plasma had no correlation to patients age, tumor stage, tumor size, histological type, ER, PR, and receptor status (Pgt;0.05). No aberrant methylation of RASSF1A gene a samples from the patients the ones ethylation in tumor tissue. CONCLUSION: The aberrant RASSF1A gene promoter methylation in plasma of breast cancer patients is significantly correlated to that in breast cancer tissue. 　　【keys; RASSF1A; methylation 　　0 引言 　　乳腺癌发生发展伴随着许多基因的改变，其中包括了抑癌基因的失活，如基因突变、染色质丢失和启动子异常甲基化等. Ras相关区域家族1A（ras association domain family 1A, RASSF1A）是2000年发现的一种候选抑癌基因［1］，其失活在乳腺癌的发生发展中具有重要意义［2-4］. 我们采用甲基化特异性PCR方法检测乳腺癌患者血浆、肿瘤组织和癌旁腺体组织中RASSF1A基因启动子甲基化的状况，并研究其临床意义. 　　1　材料和方法 　　1.1　材料 　　经病理学检查确诊后进行手术治疗的乳腺癌患者68例，均未行术前化疗. 包括乳腺癌改良根治术58例，乳腺单纯切除6例，乳腺癌根治术4例. 对年龄、肿瘤大小、病理类型、淋巴结转移、临床分期、雌性激素受体、孕激素受体和cerbB2情况进行列表（表1）. 同期采集10例乳腺纤维腺瘤和2例乳腺增生症患者的血浆作为正常对照. 　　1.2　方法 　　术前采用BD真空采血管采集乳腺癌患者肘静脉血5 mL，EDTANa2