原核生物基因表达及其调控.PPT

第八章 原核生物基因的表达及其调控 生物体的每个活细胞都含有相同的一整套基因。 基因表达具有高度的时空专一化：如肌红蛋白基因（肌细胞） 基因表达的调控：生物有机体对其基因表达的时空程序、表达速率等所进行的调节和控制。 本底水平表达：调控处于关闭状态，只翻译极少量的蛋白质 第一节 原核生物基因的转录和翻译 原核生物的DNA： 单个裸露的DNA 不编码占5% 转录和翻译同一时间，地点进行 转录水平调控(主) ，兼有翻译水平调控 第二节 大肠杆菌乳糖操纵子的正负调控 一、操纵子与操纵子模型 操纵子学说/操纵子模型： F.Jacob J.Mond（1960）E.coli lac operon( 1965诺贝尔医学生理学奖) 操纵子：核酸分子上调控基因转录活性的基本单元，由结构基因、操作子（O）和启动子（P）组成。 转录、翻译、合成蛋白 结合调节蛋白 结合RNA聚合酶 第三节 其他类型的操纵子 一、具有双启动子的半乳糖操纵子 半乳糖（gal)操纵子组成：2个互相重叠的启动子gal P1 和gal P2 、3个操作子（CAP位点、2个阻遏蛋白位点(galOe）galOi）、3个结构基因） gal P1 依赖cAMP-CAP 转录始于S1 gal P2 阻遏蛋白调节开启 转录始于S2 第五节 DNA重组对基因表达的调控 在某些细菌中，特定基因的表达与基因组内DNA重排有关。 如沙门氏菌具有运动鞭毛，它是由许多相同的鞭毛蛋白亚基装配而成。 沙门氏菌含有两个不同的结构基因H1和H2，它们编码不同的鞭毛蛋白。 第六节 蛋白质合成的自体调控 一、RF2合成的自体调控 …CUU U GAC 25 26 RF2充分时，核糖体翻译其mRNA到达此终止密码子， 被RF2识别，翻译终止（不完全肽链，无RF2活性） RF2不足时，核糖体翻译其mRNA到达此终止密码子，发生移位作用，跳过U，不被RF2识别，翻译继续，直到此基因的最后的终止密码子，在RF1的作用下，形成完整肽链（具RF2活性） 第七节 反义RNA在基因表达中的调控作用 反义RNA（anti-sense RNA)：指与目的DNA或RNA序列互补的DNA或RNA片段。 反义RNA与特定的mRNA结合的位点通常是SD序列、起始密码子AUG和部分N端的密码子，从而抑制mRNA的翻译．所以又称这类RNA为干扰mRNA的互补RNA(mRNA—interfering complementary RNA，micRNA)。 就像在色氨酸操纵子中，阻遏作用与衰减机制一起协同控制其基因表达，显然比单一的阻遏负调控系统更为有效。 一方面，当有活性的阻遏物向无活性阻遏物的转变速度极低时．衰减系统能更迅速地作出反应，使色氨酸从较高浓度快速下降到中 等浓度； 另一方面，若外源色氨酸浓度实在太低，细菌本身又没有其他的内源性色氨酸合成体系， 以致细菌难以支持自身的生长时，就需要有衰减体系加以调节——通过不终止mRNA的合成来增加Trp酶的合成从而提高内源色氨酸的浓度。 可见：衰减机制在控制基因产物的量和产物种类的配比上起着快速灵敏的调节作用，使操纵基因表达更为精密、高效。 第四节 λ 噬菌体基因组的表达调控 H1基因表达则产生Hl型鞭毛蛋白，这时细菌就处于I相(Phase l)；若是H2基因表达就产生H2鞭毛蛋白，细菌处于Ⅱ相(Phase Ⅱ)。 处于I相的细菌生长时，其中少数细菌以103／每次细胞分裂的频率而自发转变为Ⅱ相细菌；处于Ⅱ相的细菌也以同样的频率转变为I相细菌，这一过程称为相变(phase wariation) H2基因与另一个基因rH1紧密连锁，同属于一个操纵子。并协同表达。rHl编码Hl基因的阻遏蛋白．当H2和rH1表达时，由于rHl阻遏物阻止了H1基因的表达．就只合成H2鞭毛蛋白。如果H2基因和rHl基因被关闭不表达，这时H1基因便表达，合成Hl鞭毛蛋白。 相变的控制取决于含H2和rHl基因操纵子的启动基因所处的状态。含有启动基因在内的上游DNA长995核苷酸对，两边各有一段长14核苷酸对的重复，即IRL和IRR。H2基因的起始密码子开始于IRR右边的第17核苷酸对处，IRL和IRR之间的序列含有基因hin，它的产物是相变酶，可催化这段995核昔酸对序列发生包括hin基因在内的倒位。 另外，在倒位前这段序列的第950一983核昔酸对区还含有一个促进下游基因转录的启动子(p)，它使H2和rH1基因表达，于是细胞处于Ⅱ相。