妊娠和分娩中子宫平滑肌及胎盘内皮素受体A表达的初步探讨.doc

　　妊娠和分娩中子宫平滑肌及胎盘内皮素受体A表达的初步探讨 【关键词】 妊娠 　　【摘要】 目的 探讨临产前、后子宫平滑肌细胞及胎盘滋养细胞内皮素受体A(ETA)的表达变化。方法 应用免疫组化方法结合计算机图像分析技术分析60例足月妊娠剖宫产产妇子宫下段平滑肌细胞及胎盘滋养细胞ETA的表达，观察临产前、后两组的表达强度。结果 临产组子宫平滑肌细胞及胎盘滋养细胞ETA的表达显著强于未临产组，差异有显著意义(P＜001)。结论 ETA可能通过参与调节子宫平滑肌收缩和局部前列腺素的合成参与分娩发动。 　　【关键词】 分娩发动；内皮素受体；免疫组化 　　【Abstract】 Ｏbjective To study the expression of endothelin receptor A (ETA) in myometrium and placental trophoblastic cells before and after labor onset.Ｍethods Sixty en at term pregnancy en and they yometrium and placental trophoblastic cells munohistochemical SABC method and puterized quantitative image analysis.Ｒesults Ｔhe expression of ETA in myometrium and placental trophoblastic cells in the group at labor onset ay be involved in the initiation of parturition by regulating the contraction of myometrium and improving prostaglandins level. 　　【Key munohistochemistry 分娩发动的研究至今备受关注，体外实验显示内皮素1(ET１）与内皮素受体A（ETA）结合后可刺激妊娠子宫平滑肌收缩并具有增加子宫平滑肌及蜕膜等组织合成前列腺素类物质的作用［１，２］，但有人观察到，在整个妊娠期虽然测得ETA的mRNA转录水平增加了4~５倍，而ETA在总的绒毛组织和单个的滋养细胞表达的蛋白水平却呈下降趋势［３］。因此，本实验对照研究了临产前、后子宫平滑肌和胎盘组织ETA的表达，并分析其与分娩发动的关系。 　　１ 资料与方法 　　１．１ 研究对象 　　选取遵义医学院附属医院产科2002年10月至2003年5月期间足月妊娠(37～４１周）、剖宫产产妇60例，临产组及未临产组各30例。分类标准如下：①未临产组：孕妇无阵痛，胎心电子监护仪显示无宫缩，肛查宫口未开。②临产组：自然临产，胎心电子监护仪显示有规律宫缩，肛查或阴道检查宫口扩张≥2 cm。两组产妇均无妊娠并发症及合并症；标本采集前均无特殊用药。 　　12 标本采集 　　①术中胎儿娩出后、宫体及全身应用宫缩剂前，切取子宫横切口上缘小块平滑肌组织约1 cm×1 cm×05 cm；胎盘娩出后立即在母体面中央及边缘部各剪取组织一块，处理至1 cm×1 cm×05 cm；②将所取子宫平滑肌和胎盘组织用生理盐水充分洗净，中性甲醛固定24 h，梯度酒精脱水，二甲苯透明，62℃浸蜡，常规石蜡包埋。连续切片，切片厚4～6 μm，标记后4℃冰箱保存待测。 　　１．３ 实验方法 　　以免疫组化SABC法测定子宫平滑肌和胎盘滋养细胞ETA的表达。第一抗体ETA兔抗人多克隆抗体由天津灏洋生物制品科技有限公司提供，即用型SABC免疫组化染色试剂盒由武汉博士德公司提供，按说明书指示操作。免疫组化染色结果判定：光镜下胞膜、胞浆内有棕黄色颗粒为阳性，阳性细胞必须结构清晰、定位好。计算机图像分析采用15400计算机图像分析仪(四川大学提供)，每张子宫平滑肌切片随机选取10个视野，测定平均灰度值，代表子宫平滑肌ETA的表达强度。胎盘切片测定阳性细胞率(阳性细胞总面积／总扫描面积)，分别代表子宫平滑肌细胞及胎盘滋养细胞ETA的表达强度和范围。 　　１．４ 统计学分析 　　所有数据用SPSS 115统计学软件包处理。采用t检验或t’检验，结果以x±s表示。 　　２ 结果 　　２．１ 光镜所见 　　光镜下可见ETA在子宫平滑肌细胞胞浆和胞膜表达，呈棕黄色颗粒。临产组阳性着色明显强于未临产组，且视野中着色范围亦较未临产组广。两组胎盘绒毛滋养细胞均有ETA阳性染色，ETA定位于合体滋养细胞、细胞滋养细胞及间质细胞；阳性颗粒分布于胞膜、胞浆。临产组染色强度及阳性细胞分布范围均大于未临产组。 ２．２ 计算机图