左旋精氨酸对犬急性心肌缺血血小板膜蛋白GMP140 的作用.doc

　　左旋精氨酸对犬急性心肌缺血血小板膜蛋白GMP140 的作用 摘要:目的在犬急性心肌缺血模型上观察血浆GMP140水平及血流动力学变化，探讨左旋精氨酸对其影响.方法24只犬随机等分为3组:生理盐水组（A组），灌注左旋精氨酸组（B组）和灌注NO合成酶阻断剂L-MNNA组（C组）.分别于狭窄前和狭窄后5，15，30，60和120min检测远端冠状动脉压（DCP）、冠脉每分血流量（CBF）、血浆NO2-和血小板α颗粒膜蛋白GMP140.结果B组DCP较A组下降，CBF显著增加（Plt;0.01），GMP140明显低于A组（Plt;0.01），NO2-明显高于A组（Plt;0.01）;C组较A组DCP升高，CBF下降（Plt;0.05），GMP140高于A组（Plt;0.05），血浆NO2-与A组无明显差异（Pgt;0.05）.结论左旋精氨酸增加冠脉血流，降低血浆GMP140;抑制NO合成酶，防止血小板集聚，改善微循环，可以是其保护缺血心肌的机制. 　　Keyicmyocardium;GMP140;L-Arginie;nitricoxide 　　Abstract:AIMThedogmodelundersevereischemicmy-ocardiumechanism.METHODSDogs　lydividedintothreegroups.A:Perfusing0.9%NaClgroup.B:PerfusingL-Arggroup.C:PerfusingNOsynthaseblockingL-MNNAgroup.DCP，CBF，NO　2-andGMP　140inplasmaeasuredbeforestenosisandafterstenosisinsertion.RESULTSDCPdeclinedandCBFin-creased（Plt;0.01）ingroupB.GMP　140uchloarkabledifferencebeticmyocardium.ItmaybeitsmechanismthatL-argfacilitatesNOsynthesisandpre-ventsplateletactivation. 　　0引言 　　一氧化氮（NO）对冠脉血管张力、血流量的调节属生理性调节因素之一［1］，但NO对冠脉狭窄时血小板的影响报道较少.本实验建立了犬急性严重缺血心肌模型，检测其血浆GMP140水平，并应用NO合成的特异性底物左旋精氨酸及其特异性阻断剂L-MN-NA对其进行灌注，以探讨左旋精氨酸/NO途径对急性严重缺血心肌的保护机制. 　　1材料和方法 　　1.1材料杂种犬24只由第四军医大学动物实验中心提供，雌雄不拘，体质量15～25kg.左旋精氨酸（L-arginie）由江苏张家巷东沙试剂厂提供.L-MN-NA（NO合成酶阻断剂）购自美国Sigma公司.血浆GMP140测定药盒由苏州医学院血栓与止血研究室提供.NO2-标准液由上海生化研究所提供.实验主要仪器:八导生理记录仪由日本光电制造（RM-6000型）.电磁流量计由日本光电制造（MFV-2100型）.-免疫计数仪由芬兰LKB制造（SL-1272型）.荧光分光光度计由日本日立制造（RF-5000型）. 　　1.2方法 　　1.2.1动物模型制备30gL-1戊巴比妥钠（30mgkg-1，iv）麻醉犬后，气管插管，行正压人工呼吸.暴露心脏，缝制“心包摇蓝”.在冠脉左前降支（LAD）第一分支下方处分离冠脉约2cm，安放电磁流量计探头测冠脉血流量（CBF），探头后方置入一自制动脉微米缩窄器造成冠脉重度狭窄［使CBF减少（70±1）%，远端小动脉压（DCP）下降至（5.4±0.1）kPa］，将右股静脉导管及冠脉狭窄远端压力导管连接八导生理记录仪.分别于冠脉狭窄前和狭窄后5，15，30，60和120min记录CBF和DCP变化，并收集血样. 　　1.2.2动物分组犬随机分3组，每组8只.A组:缺血心肌组，狭窄即刻冠脉内灌注等量生理盐水（0.2mLmin-1）;B组:左旋精氨酸组，狭窄即刻冠脉内灌注左旋精氨酸（1gL-1，1mLmin-1）;C组:L-MN-NA组，狭窄即刻冠脉内灌注L-MNNA（10gL-1，10mLmin-1）.用多导生理记录仪记录CBF和DCP.应用亚硝酸根荧光光度测定法测定NO2-（NO代谢产物）含量.采用双抗夹心法和固相免疫放射实验测定GMP140（μgL-1），具体操作严格按药盒说明进行. 　　统计学处理:实验结果以x±s表示，自身比较采用配对t检验，组间比较用团体t检验. 　　2结果 　　2.1各组间血流动力学变化使LAD狭窄致CBF减少70%时开始灌注药物，灌流15min后，B组CBF显著