怀牛膝泛糖前后齐墩果酸的含量变化研究.doc

　　怀牛膝“泛糖”前后齐墩果酸的含量变化研究 【关键词】 怀牛膝；泛糖；齐墩果酸；薄层扫描法 　　Abstract:Objective and methods To determine the content of triterpenoid saponins before and after strorage by double etry. The , and oleanolic acid aterial. Results The contents of oleanolic acid varied from 1.25% to 1.52%. Conclusion The contents of triterpenoid saponins decreased after storage. 　　Key atography 　　牛膝系苋科Amaranthaceae牛膝属植物牛膝Achyranthes bidentata Blume的根，具有补肝肾、强筋骨、活血逐瘀、引血下行之功效。牛膝在贮藏过程中易“泛糖”，引起药材的质变，使药效降低，影响临床疗效［1-4］。本文对牛膝“泛糖”前后齐墩果酸含量变化的情况进行研究，报道如下。 　　1 仪器与材料 　　1.1 仪器 　　 　　FN2022型电热干燥箱（长沙仪器仪表厂），SHZB水浴恒温振荡器（上海跃进医疗器械厂），DZF1B型真空干燥箱（上海跃进医疗器械厂），CS9301 PC双波长飞点扫描分析仪（日本岛津），METTLER AE 240 电子 分析天平（瑞士），939薄层制板器（重庆南岸贝尔德仪器技术厂），定量毛细管（美国Drummond Co.）。 　　1.2 药品 　　 　　齐墩果酸对照品（ 中国 药品生物制品检定所，批号：8501）；其余所用试剂为分析纯。 　　1.3 药材 　　采自河南省武陟县大丰乡驾部村，经河南中医学院曹继华教授鉴定为苋科牛膝属植物牛膝Achyranthes bidentata Blume.的根，符合《中华人民共和国药典》2005版一部规定，商品规格为二肥。“泛糖”牛膝分为4个等级：正常牛膝、“泛糖”开始、“泛糖”较重、“泛糖”严重，色度指标分别为：0.070 3，0.120 8，0.284 6，0.471 2。 　　2 实验部分 　　2.1 层析条件的确定 　　薄层板：硅胶 G，0.5 mm，110 ℃活化30 min；展开剂：三氯甲烷甲醇甲酸（体积比20∶1∶0.2），饱和1 h，展开12 cm；显色剂：5%磷钼酸试液，105 ℃烘5 min，显蓝色斑点。 　　扫描条件：反射法锯齿型双波长扫描，线性参数SX=3，狭缝0.4 mm×0.4 mm，灵敏度中等，背景校正ON，检测信号峰面积，λs=665 nm，λR=380 nm。 　　2.3 精密度试验 　　在同一硅胶G薄层板上点相同量对照品溶液2 μL,共点5个点，展开，显色，测得各斑点峰面积积分值的RSD值为1.53%。表明精密度良好。 　　2.4 稳定性试验 　　精密吸取齐墩果酸对照品溶液2 μL，点于硅胶G薄层板上，展开，显色，扫描测定，每隔30 min测定一次斑点峰面积积分值，结果峰面积RSD值为1.60%，表明齐墩果酸在3 h内基本稳定。 　　2.5 加样回收率试验 　　取牛膝粉末（40目，50 ℃干燥48 h）约1 g，6份，精密称定，置圆底烧瓶中，分别加入10.020 mg/mL齐墩果酸对照品溶液1.5 mL,然后加2 mol/L盐酸15 mL，浸泡12 h，其余按“ 2.6.1”项下同法操作，得到6份加样回收供试品溶液。分别精密吸取加样回收供试品溶液4 μL,齐墩果酸对照品溶液4、6 μL，点于同一薄层板上，展开，显色，扫描测定，根据外标两点法 计算 ，见表1。 　　表1 加样回收率试验（略） 　　Tab.1 Results of recovery test 　　2.6 含量测定［5-7］ 　　2.6.1 供试品溶液的制备 取不同程度“泛糖”的牛膝粉末（40目，50 ℃干燥48 h）约2 g，精密称定，置圆底烧瓶中，加入2 mol/L盐酸30 mL回流4 h，冷至室温，过滤得滤渣，用蒸馏水洗至中性，60 ℃烘干，于100 mL索氏提取器中加入三氯甲烷，提取至无色，提取液蒸干，残渣用三氯甲烷溶解并转移至25 mL量瓶中，用三氯甲烷稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液。 　　2.6.2 不同程度“泛糖”牛膝中齐墩果酸的含量测定 照薄层色谱法（《 中国 药典》2005版一部附录VIB）试验，精密吸取各供试品溶液4 μL，点于同一硅胶G薄层板上，并交叉点4 μL、6 μL齐墩果酸的对照品溶液，按上述层析条件展开，显色，扫描测定，用外标法计算不同程度“泛糖”