第11单元 第42课时 微生物培养与应用3.13.pptVIP

第十一单元;1．涵盖范围;2．考情分析;3．复习指导;第 42 课时;突破考点·提炼方法;考点131　 生物技术手段——微生物实验室培养; 2.培养基的配制原则和营养构成; (2)培养基的营养构成 ①各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。 ②不同培养基还要满足不同微生物对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。 3．配制牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤及注意事项 (1)步骤：计算―→称量―→溶化―→灭菌―→倒平板 (2)注意事项 ①倒平板的温度一般在50℃左右适宜，温度过高会烫手，过低培养基又会凝固。 ②平板需倒置，这样既可使培养基表面的水分更好地挥发，又可防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。 ; 4．纯化大肠杆菌的操作过程及注意事项 (1)原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这???菌落就是一个纯化的细菌菌落。 (2)方法：平板划线法、稀释涂布平板法。 ①平板划线法：平板划线法中细菌的分离和稀释过程发生在接种环在固体平板表面上的移动划线过程中。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成纯种的单个菌落。(如下图); 注意　a．划线时最后一区域不要与第一区域相连。 b.划线用力大小要适当，防止用力过大将培养基划破。 ②稀释涂布平板法 Ⅰ.系列稀释操作(图1) a．将分别盛有9 mL水的6支试管灭菌，并按101～106的顺序编号。 b．用移液管吸取1 mL培养的菌液，注入101倍稀释的试管中。用手指轻压移液管上的橡皮头，吹吸3次，使菌液与水充分混匀。 c．从101倍稀释的试管中吸取1 mL稀释液，注入102倍稀释的试管中，重复b步混匀操作。以此类推，直到完成最后1支 试管的稀释。; 注意　移液管需要经过灭菌。操作时，试管口和移液管应在离火焰1～2 cm处。;图2; 1．自养微生物和异养微生物的营养比较; 2.划分依据：自养微生物与异养微生物类型划分的主要依据是能否以无机碳作为生长的主要或唯一碳源，而与氮源无关。自养微生物以CO2或碳酸盐为主要或唯一碳源进行代谢生长；异养微生物必须以有机物作为碳源进行代谢生长。 3．自养微生物的能源 (1)利用光能，如蓝藻等。 (2)依靠物质氧化过程中释放的能量，如硝化细菌，能利用NH3氧化过程中释放的化学能，NH3既作为氮源，又作为能源。 4．异养微生物的能源 主要来源于有机物的氧化分解，碳源不仅为异养微生物提供构成细胞的物质，而且提供完成整个生命活动所需的能量。; 1．(2011·新课标全国卷，39)有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题： (1)在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以________为唯一碳源的固体培养基上。从功能上讲，该培养基属于__________培养基。 (2)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即________________和________________。 (3)为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力__________。; (4)通常情况下 ，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、___________和___________。无菌技术要求实验操作应在酒精灯________附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。; 解析 (1)从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株，使用的培养基应是以原油为唯一碳源的选择培养基，通过控制碳源这种营养成分，来促进能高效降解原油的菌株的生长，抑制其他微生物的生长。 (2)菌种纯化培养时，常采用平板划线法和稀释涂布平板法接种。 (3)当固体培养基上长出单菌落后，可通过比较菌落周围分解圈的大小，来判断菌株降解原油能力的大小。一般来说，分解圈越大说明该菌株的降解能力越强，反之则越弱。; 排雷　 (1)平板划线操作第一次划线及每次划线之前都需灼烧灭菌，划线操作结束仍需灼烧接种环，每次灼烧目的不同。 (2)灼烧接种环之后，要冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。;考点132　 生物技术实践——土壤中分解尿素的细菌的 分离与计数; (2)间接计数法(活菌计数法) ①原理：当样品的稀释度足够